Anticorpo Monoclonale Topo Anti-IgM di Coniglio (Fc) per Citometria a Flusso - P03988

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Background Biologico: Funzione e Localizzazione della Regione Fc dell'IgM

• La regione C della catena mu Ig, forma secretata (P03988), è un componente chiave della regione costante dell'IgM che fornisce supporto strutturale all'anticorpo.
• È una glicoproteina secretata, come annotato in UniProt, coerentemente con la sua presenza nel siero come componente dell'IgM pentamerica.
• La proteina presenta legami disolfuro che stabilizzano la piegatura dell'immunoglobulina e mediano l'associazione delle catene pesanti.
• Contiene domini simili alle immunoglobuline, che la collocano nella superfamiglia delle immunoglobuline.
• Lo splicing alternativo genera diverse isoforme della catena mu, consentendo sia forme legate alla membrana che forme secretate di IgM (questa voce rappresenta la forma secretata).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è coniugato direttamente ad , un fluoroforo verde brillante e fotostabile, quindi è immediatamente pronto per la citometria a flusso senza necessità di un anticorpo secondario.
• L'immunogeno corrisponde alla regione Fc (amminoacidi 107-458) dell'IgM di coniglio, garantendo un riconoscimento specifico del dominio costante della catena pesante e riducendo la reattività crociata con altre immunoglobuline o catene leggere di coniglio.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di colorazione ottimale per il tuo tipo cellulare; un intervallo di partenza di 0,1-1 µg per milione di cellule è comune per la colorazione di superficie.
• Includere controlli appropriati, come un anticorpo controllo dell'isotipo e un colorante per la vitalità, per distinguere il legame specifico da quello non specifico.
• Se si colora l'IgM secretata o sierica, considerare il potenziale alto fondo di colorazione; il blocco con siero normale di coniglio può migliorare la specificità.
• Evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento; conservare a 4°C al riparo dalla luce per un uso a breve termine, oppure aliquotare e conservare a -20°C per la conservazione a lungo termine.
• Convalidare la specificità testando su splenociti di coniglio o linee cellulari B, e confermare l'assenza di reattività con IgM di altre specie indicate come non reattive in modo crociato.

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