Anticorpo monoclonale di coniglio MYH6 per WB, IF-P, ELISA - P13533

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MYH6

• MYH6 codifica la miosina-6, nota anche come catena pesante della miosina alfa cardiaca (alpha-MHC), una proteina motoria della miosina di classe II.
• La miosina-6 è il componente principale del filamento spesso dei sarcomeri cardiaci, converte l'energia chimica dall'idrolisi dell'ATP in forza meccanica per la contrazione muscolare.
• La proteina si localizza nel citoplasma, in particolare nelle miofibrille e nei filamenti spessi delle cellule del muscolo cardiaco.
• Contiene le caratteristiche tipiche del dominio motore: una regione N-terminale di legame all'actina, un sito di legame per l'ATP e una coda C-terminale a superavvolgimento responsabile della dimerizzazione e della formazione del filamento.
• Sono annotate multiple modifiche post-traduzionali, tra cui fosforilazione e metilazione, che suggeriscono ruoli regolatori nella funzione della miosina e nella performance cardiaca.
• Le mutazioni nel gene MYH6 sono associate a patologie umane come il difetto del setto atriale (ASD) e la cardiomiopatia ipertrofica familiare (CMH), che sottolineano la sua importanza clinica.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno comprende i residui 160–260, che si trovano all'interno del dominio motore conservato della miosina, altamente identico tra uomo e topo, in linea con la reattività crociata osservata.
• Per Western blot, la banda attesa è di ~224 kDa. Assicurare una durata sufficiente dell'elettroforesi e condizioni di trasferimento ottimizzate (ad esempio, tampone Towbin a bassa concentrazione di metanolo) per trattenere e trasferire in modo efficiente le proteine ad alto peso molecolare.
• Nell'immunofluorescenza su tessuto o cellule fissati, permeabilizzare accuratamente e utilizzare un terreno di montaggio anti-sbiadimento per preservare il segnale su campioni spessi di muscolo cardiaco.
• Quando si sviluppano saggi ELISA, convalidare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevamento nella matrice biologica pertinente, prestando attenzione alla potenziale reattività crociata con altre isoforme di miosina presenti nel campione.
• Il legame non specifico può essere ridotto utilizzando agenti di blocco appropriati e diluendo l'anticorpo nel tampone raccomandato; si consiglia un'ottimizzazione empirica.

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