mAb anti-Nanog di coniglio - Q80Z64

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della proteina homeobox NANOG

• La proteina homeobox NANOG (nota anche come proteina 4 associata alle cellule ES, proteina homeobox di tipo NK con espressione specifica dell'embrione precoce, fattore di trascrizione homeobox Nanog) è un regolatore della trascrizione essenziale per la proliferazione e l'autorinnovamento della massa cellulare interna e delle cellule staminali embrionali (ES) (PubMed:25825768). Riferimenti correlati: PMID:25825768
• Induce la pluripotenza nelle cellule ES e ne impedisce la differenziazione verso le linee dell'endoderma extraembrionale e del trofectoderma. Blocca la differenziazione mesodermica delle cellule ES indotta dalla proteina morfogenetica dell'osso interagendo fisicamente con SMAD1 e interferendo con il reclutamento di coattivatori nei complessi trascrizionali SMAD.
• Agisce sia come attivatore sia come repressore trascrizionale. Si lega in modo ottimale alle sequenze consenso del DNA 5'-TAAT[GT][GT]-3' o 5'-[CG][GA][CG]C[GC]ATTAN[GC]-3'. Si lega al promotore di POU5F1/OCT4.
• Reprime automaticamente la propria espressione nelle cellule ES in differenziazione: in seguito all'interazione con ZNF281/ZFP281, recluta il complesso NuRD sul proprio promotore, determinando la repressione trascrizionale.
• Quando è sovraespresso, favorisce l'ingresso delle cellule nella fase S e la proliferazione.
• La localizzazione subcellulare è esclusivamente nucleare.
• Specificità tissutale: non viene espresso negli ovociti e nelle spermatogonie (a livello proteico) ed è assente in molti organi somatici, nell'ovaio, nei testicoli, nei fibroblasti e nelle linee cellulari ematopoietiche.
• Lo splicing alternativo e importanti modifiche post-traduzionali (ad esempio la fosforilazione) possono regolarne l'attività; è classificato tra le parole chiave che includono legame al DNA, homeobox, attivatore, repressore, proteina dello sviluppo e proteoma di riferimento.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 160–305 di Nanog murino, includendo il dominio homeobox e le regioni adiacenti. Questa regione è altamente conservata tra topo e uomo, a supporto della reattività crociata osservata. Verificare la specificità nel proprio sistema modello.
• Per il Western blot, nei lisati di cellule ES murine è prevista una banda specifica a circa 34 kDa. Utilizzare controlli positivi e negativi appropriati (ad esempio NIH/3T3 come controllo negativo) per confermare le prestazioni dell'anticorpo.
• Nei test ChIP, questo anticorpo può essere adatto per l'arricchimento di loci genomici legati a Nanog, come il promotore di POU5F1; considerare l'ottimizzazione della reticolazione e la titolazione dell'anticorpo.
• Per la citometria a flusso intracellulare, assicurarsi di ottenere una permeabilizzazione adeguata e utilizzare controlli isotipici appropriati. Titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio tipo cellulare.

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