NCR3 Coniglio pAb per WB, ELISA - O14931

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NCR3

• NCR3 (Recettore 3 di attivazione della citotossicità naturale), noto anche come NKp30 o CD337, è un recettore attivatore delle cellule natural killer (NK) codificato dal gene NCR3.
• Funziona come recettore di membrana cellulare che innesca la citotossicità delle cellule NK upon legame a ligandi extracellulari come BAG6 e NCR3LG1, promuovendo l'uccisione delle cellule tumorali.
• Il coinvolgimento di NCR3 da parte del suo ligando BAG6 promuove anche la maturazione delle cellule dendritiche mieloidi (DC), sia eliminando le DC immaturre che inducendo il rilascio di TNF-α e IFN-γ da parte delle cellule NK.
• Il recettore è selettivamente espresso sulla superficie di tutte le cellule NK a riposo e attivate, con una debole espressione rilevata nella milza.
• Come glicoproteina transmembrana di tipo I, NCR3 contiene un dominio simile a immunoglobulina nella sua regione extracellulare e si basa su proteine adattatrici associate (es. CD3ζ, FcεRIγ) per la trasduzione del segnale.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione N-legata e la formazione di un legame disolfuro all'interno del dominio Ig, che sono critiche per il corretto ripiegamento e il riconoscimento del ligando.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme, aggiungendo alla diversità funzionale del recettore nella sorveglianza immunitaria.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 19-135), che include la regione simile a Ig di legame del ligando; pertanto, si prevede che l'anticorpo riconosca il recettore nativo sulla superficie cellulare.
• Per il Western blotting in condizioni riducenti, considerare un carico di 20-40 µg di lisato da linee cellulari NK (es. NK-92) o cellule NK primarie attivate, e validare la banda al peso molecolare previsto (~22 kDa).
• A causa della glicosilazione e della potenziale variabilità delle isoforme, il peso molecolare osservato in WB potrebbe apparire leggermente superiore; l'inclusione di controlli di deglicosilazione o l'uso di linee cellulari specifiche possono aiutare a verificare la specificità.
• Nelle ELISA, possono essere esplorati formati con rivestimento di proteina NCR3 ricombinante o basati su cellule; le condizioni di blocco e rilevamento appropriate dovrebbero essere ottimizzate per il sistema di saggio specifico.

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