Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Neurofilament H per WB - P12036

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del Neurofilament H

• Il Neurofilament H (NFH), noto anche come proteina del neurofilamento da 200 kDa o proteina H del tripletto dei neurofilamenti, è codificato dal gene NEFH e appartiene alla famiglia dei filamenti intermedi.
• NEFH è un componente chiave del citoscheletro neuronale e, insieme a NEFL e NEFM, mantiene il calibro neuronale; svolge un ruolo unico ed essenziale negli assoni maturi, che non può essere completamente compensato dalle due proteine dei neurofilamenti più piccole.
• Può inoltre cooperare con le proteine dei filamenti intermedi neuronali peripherin (PRPH) e internexin (INA) per formare robuste reti filamentose nei neuroni.
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente citoplasmatica, con arricchimento nel citoscheletro, nelle proiezioni cellulari e soprattutto negli assoni.
• La proteina è soggetta a estese modificazioni post-traduzionali, inclusa la fosforilazione, ed è implicata in diverse malattie neurodegenerative, come la malattia di Charcot-Marie-Tooth di tipo 2CC e la sclerosi laterale amiotrofica.
• UniProt indica un peso molecolare di circa 112 kDa (111838 Da), coerente con le dimensioni comunemente riportate della proteina a lunghezza completa.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Poiché l'immunogeno comprende la regione della coda C-terminale (aa 873–1020), si prevede che questo anticorpo rilevi NEFH a lunghezza completa e che possa non reagire con isoforme troncate prive di questa regione. Si consiglia di effettuare una validazione nel proprio sistema campione.
• Per il Western blot, si prevede una banda intorno a 112 kDa. Utilizzare controlli appropriati per il caricamento delle proteine e una preparazione del campione adeguata per prevenire la degradazione di questa proteina di grandi dimensioni.
• Nell'immunofluorescenza (IF-P) e nell'immunoistochimica (IHC-P), ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per preservare la struttura filamentosa; nei tessuti neuronali è prevista una marcata colorazione assonale.
• In quanto anticorpo monoclonale di coniglio, offre un'elevata coerenza tra i diversi lotti; utilizzare reagenti secondari anti-coniglio appropriati per la rilevazione.
• La reattività crociata con NEFH di topo e ratto lo rende adatto agli studi di neuroscienze traslazionali che utilizzano modelli di roditori; confermare la reattività se si lavora con altre specie.

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