Anticorpo policlonale di coniglio anti-NF-kB p65/RelA - Q04206

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di NF-kB p65/RelA

• NF-kB p65 (RELA) è una subunità fondamentale del complesso del fattore di trascrizione NF-kB, che regola le risposte immunitarie e infiammatorie, la crescita cellulare, la differenziazione e l'apoptosi.
• Il complesso NF-kB più abbondante è l'eterodimero RELA-NFKB1, ma RELA può anche formare omodimeri o eterodimeri con REL, ciascuno dei quali si lega ai siti kappa-B con affinità e specificità distinte.
• RELA è essenziale per l'espressione dei geni delle citochine nelle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:15790681
• La localizzazione subcellulare è strettamente controllata: RELA viene trattenuta nel citoplasma dagli inibitori di I-kB e trasloca nel nucleo in seguito all'attivazione.
• RELA è un fattore di trascrizione chiave che media la risposta all'interferone durante l'infezione da SARS-CoV-2. Riferimenti correlati: PMID:33440148
• Modifiche post-traduzionali quali fosforilazione, acetilazione, metilazione, ubiquitinazione e S-nitrosilazione modulano l'attività e la stabilità di RELA.
• Lo splicing alternativo e i riarrangiamenti cromosomici di RELA sono stati associati a varianti patologiche.
• La proteina è coinvolta nelle interazioni ospite-virus ed è un membro del proteoma di riferimento identificato mediante proteomica.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 450-550) di p65/RelA umano e può rilevare la proteina a lunghezza intera e alcune isoforme. Convalidare la specificità utilizzando controlli positivi e negativi appropriati.
• Per il Western blot, si prevede una banda predominante intorno a 60 kDa. L'uso di estratti nucleari può migliorare il rilevamento in seguito all'attivazione della via NF-kB.
• Nell'immunofluorescenza e nell'immunoistochimica, la localizzazione nucleare viene generalmente osservata dopo la stimolazione. Includere controlli non stimolati appropriati e confermare mediante controcolorazioni.
• La reattività crociata con topo e ratto consente l'utilizzo in modelli di roditori; considerare una validazione specie-specifica per il proprio sistema sperimentale.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevazione.

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