pAb policlonale coniglio anti-NF-κB2 – Anticorpo policlonale per WB, IF/ICC, ELISA - Q00653

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NF-κB2

• NF-κB2 codifica il precursore p100 e la sua subunità processata p52, componente della famiglia dei fattori di trascrizione NF-κB.
• Forma omodimeri o eterodimeri con le proteine Rel (RELA, RELB, REL) per regolare i geni coinvolti nella risposta immunitaria, nell'infiammazione, nella crescita cellulare e nell'apoptosi.
• Nella via di segnalazione non canonica di NF-κB, p100 subisce una processazione proteasomale in p52, che porta alla formazione del complesso attivatore RelB-p52.
• Gli omodimeri p52-p52 agiscono da repressori trascrizionali, mentre i complessi p52-RELA e p52-RELB possono attivare i geni bersaglio.
• La proteina si localizza sia nel citoplasma sia nel nucleo: p100 citoplasmatico trattiene le proteine NF-κB associate, mentre p52 si trasloca nel nucleo dopo l'attivazione.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, ubiquitinazione ed eventi di processazione che regolano la sua attività (parole chiave UniProt: Fosfoproteina, Legame isopeptidico, Coniugazione Ubl).
• NF-κB2 è implicato nella regolazione dell'orologio circadiano, reprimendo l'attività di CLOCK-BMAL1 insieme a RELB.
• Riarrangiamenti genetici e mutazioni in NFKB2 sono associati a immunodeficienze come la CVID10.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi 690-899 di NF-κB2 umano (regione C-terminale di p100), quindi può riconoscere sia il precursore p100 sia la forma processata p52.
• Per Western blot (WB), è possibile osservare una banda a circa 97 kDa (p100) e una banda più piccola a circa 52 kDa (p52), a seconda della processazione cellulare.
• Si consiglia di utilizzare lisati cellulari appropriati o stimoli che attivano la via non canonica di NF-κB per valutare la processazione di p100 in p52.
• Per immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), la fissazione e la permeabilizzazione devono essere ottimizzate per rilevare sia la frazione citoplasmatica sia quella nucleare.
• È stata riportata reattività crociata con campioni di topo; convalidare sempre nel sistema di campionamento utilizzato.
• ELISA può essere adatto per rilevare la proteina NF-κB2 ricombinante o endogena; si consiglia di titolare la concentrazione dell'anticorpo.

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