pAb di coniglio contro NFATC4 per WB e ELISA - Q14934

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NFATC4

• NFATC4 (conosciuto anche come NFAT3) è un membro della famiglia dei fattori di trascrizione NFAT, caratterizzato da un dominio di binding al DNA conservato che riconosce la sequenza consenso 5'-GGAAAAT-3'.
• Funziona come fattore di trascrizione regolato da Ca2+, che si sposta tra citoplasma e nucleo dopo l'attivazione calcio-dipendente.
• Nelle cellule T, NFATC4 stimola la trascrizione di geni citochinici, tra cui IL2 e IL4, svolgendo un ruolo fondamentale nell'attivazione immunitaria. Riferimenti correlati: PMID:18347059, PMID:18668201, PMID:7749981
• NFATC4 è essenziale per lo sviluppo cardiaco embrionale; regola geni cardiaci come NPPB/BNP e MYH7 e partecipa al metabolismo energetico mitocondriale nei cardiomiociti.
• Promuove la differenziazione degli adipociti legandosi al promotore del gene PPARG e modulandone l'attività trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:11997522
• Nel sistema nervoso, NFATC4 contribuisce alla neurogenesi ippocampale e alla formazione della memoria a lungo termine, e attiva il promotore di BACE1, influenzando potenzialmente la maturazione di APP. Riferimenti correlati: PMID:25663301
• È espresso ampiamente, con livelli elevati nella placenta, polmone, rene, testicolo, ovaio e cuore; nell'ippocampo si localizza nel giro dentato, nei neuroni CA3 e nella fessura ippocampale.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno (aa 560-710) corrisponde a una regione conservata tra NFATC4 umano e murino, che supporta la reattività crociata prevista; validare sempre nel contesto specifico del vostro campione.
• Per Western blot (WB), il peso molecolare previsto è ~95 kDa; utilizzare un gel SDS-PAGE a bassa percentuale e ottimizzare le condizioni di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare.
• Essendo un anticorpo policlonale, può rilevare più membri della famiglia NFAT se gli epitopi sono conservati; confermare la specificità tramite esperimenti di knockdown o sovraespressione nel vostro sistema cellulare.
• Per ELISA, i protocolli standard per anticorpi policlonali devono essere ottimizzati in termini di concentrazione di coating e condizioni di blocco per ottenere un rapporto segnale/rumore ottimale.
• Data la traslocazione nucleo/citoplasmatica di NFATC4, considerare la frazionamento subcellulare o la stimolazione (ad esempio con ionomicina) per arricchire le forme nucleari attivate nei vostri campioni.

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