Anticorpo Policlonale NFS1 da Coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y697

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della NFS1

• La NFS1 è una cisteina desulfurasi appartenente alla famiglia delle aminotransferasi dipendenti da piridossal fosfato di classe V. Costituisce la componente fondamentale di trasporto dello zolfo nel complesso di assemblaggio mitocondriale dei cluster ferro-zolfo (ISC), catalizzando la desolfurazione della L-cisteina in L-alanina e formando un intermedio persolfuro sulla cisteina del sito attivo (PubMed:18650437, PubMed:29097656, PubMed:31101807).
• Come parte del macchinario ISC, la NFS1 trasferisce lo zolfo del persolfuro alla proteina scheletro ISCU in modo dipendente da FXN per avviare l'assemblaggio del cluster [2Fe-2S]. Il processo viene completato con gli equivalenti riducenti da FDX2 e il trasferimento del cluster mediato da chaperoni alle apoproteine bersaglio.
• Oltre alla biogenesi di ISC, la NFS1 agisce come donatore di zolfo per MOCS3, partecipando alla biosintesi del cofattore molibdeno, evidenziando un doppio ruolo nelle vie essenziali di traffico dello zolfo (PubMed:18650437, PubMed:23593335).
• La proteina si localizza in diversi compartimenti subcellulari: mitocondrio, citoplasma, citosol, nucleo e centrosoma, riflettendo la sua ampia distribuzione cellulare.
• L'espressione tissutale è massima nel cuore e nel muscolo scheletrico, con rilevazione aggiuntiva in cervello, fegato e pancreas.
• Parole chiave e caratteristiche UniProt includono iniziazione alternativa, splicing alternativo, variante patologica (COXPD52), legame con piridossal fosfato e identificazione proteomica.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 208–457 della NFS1 umana. Questa regione si trova all'interno del dominio catalitico conservato, pertanto l'anticorpo ottenuto può riconoscere la NFS1 full-length e potenzialmente alcune isoforme di splicing. Convalidare la specificità nel proprio campione di interesse.
• Per Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 50 kDa. Utilizzare controlli di caricamento appropriati e verificare il pattern delle bande nel tessuto o nella linea cellulare di interesse.
• Per immunofluorescenza e immunocitochimica, è atteso un pattern di colorazione mitocondriale e citosolica. Si consiglia la co-colorazione con marcatori di organelli per confermare la localizzazione.
• L'ELISA può essere utilizzata per quantificare la NFS1 ricombinante o endogena. Ottimizzare le condizioni di rivestimento e la concentrazione dell'anticorpo utilizzando una curva standard di antigene noto.
• La reattività crociata è riportata per uomo, topo e ratto; per altre specie, si consigliano l'allineamento di sequenza in silico e test pilota.

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