Anticorpo monoclonale coniglio NFYA per WB, IP, IHC-P, ChIP, ELISA - P23511

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NFYA

• NFYA codifica per la subunità alfa del fattore di trascrizione eterotrimerico NF-Y, anche designato proteina legante il DNA della scatola CAAT subunità A (HAP2/CBF-B).
• NF-Y lega specificamente il motivo 5'-CCAAT-3' nei promotori dei geni bersaglio, funzionando come attivatore o repressore trascrizionale a seconda delle interazioni con i cofattori.
• Regola direttamente verso l'alto il gene centrale dell'orologio circadiano BMAL1, collegando NF-YA alla regolazione del ritmo biologico.
• Si localizza esclusivamente nel nucleo.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e la proteina è soggetta a splicing alternativo.
• Parole chiave rilevanti: Legame al DNA, attivatore, fosfoproteina, splicing alternativo, ritmi biologici, regolazione della trascrizione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno ricombinante copre la regione C-terminale (aa 262–332) di NFYA umano, che è altamente conservata tra uomo, topo e ratto.
• Sulla base del peso molecolare previsto di ~34–37 kDa, è possibile utilizzare condizioni standard di SDS-PAGE e Western blotting, ma convalidare utilizzando lisati di controllo di specie/tessuti rilevanti.
• Per l'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), si raccomandano l'estrazione nucleare e un crosslinking ottimizzato a causa della localizzazione nucleare del fattore di trascrizione.
• Le prestazioni in ELISA possono richiedere un'attenta selezione dell'antigene di rivestimento (proteina ricombinante o peptide sintetico); titrare di conseguenza la concentrazione dell'anticorpo.
• Includere sempre controlli positivi e negativi appropriati, specialmente quando si testano campioni o specie meno caratterizzati.

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