NLRP1 Rabbit pAb per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9C000

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NLRP1

• NLRP1 (proteina contenente domini NACHT, LRR e PYD 1) è una proteina multidominio nota anche come CARD7, DEFCAP, NAC e NALP1. Funge da componente sensore dell'infiammasoma NLRP1, un complesso sopramolecolare che si assembla nel citosol in risposta a segnali associati ai patogeni e media la piroptosi e il rilascio di citochine infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:12191486, PMID:17349957, PMID:22665479, PMID:22801494, PMID:33852854, PMID:35594856
• Upon activation, NLRP1 recruits pro-caspase-1 (proCASP1) via the adaptor PYCARD/ASC, triggering CASP1 autoproteolysis. Active CASP1 cleaves pro-IL1B, pro-IL18, and gasdermin-D (GSDMD), leading to cytokine secretion and pyroptotic cell death. In GSDMD-deficient contexts, NLRP1 inflammasomes can engage CASP8 and gasdermin-E (GSDME). Riferimenti correlati: PMID:12191486, PMID:17349957, PMID:22665479, PMID:33852854, PMID:35594856
• NLRP1 rileva diversi segnali associati a patogeni e danni: le proteasi 3C del rinovirus umano clivano NLRP1 per attivarlo; l'RNA a doppia elica (dsRNA) lungo agisce come sensore diretto; l'irradiazione UV-B induce collisioni dei ribosomi che attivano NLRP1 tramite la fosforilazione di MAP3K20; e l'inibitore della dipeptidil peptidasi Val-boroPro attiva anche l'infiammasoma. Riferimenti correlati: PMID:33093214, PMID:33243852, PMID:35857590
• NLRP1 viene elaborato costitutivamente all'interno del suo dominio FIIND, producendo frammenti N- e C-terminali associati in modo non covalente che mantengono uno stato autoinibito. I segnali derivati da patogeni o danni inducono l'ubiquitinazione e la degradazione proteosomiale del frammento N-terminale, liberando il frammento C-terminale per oligomerizzare e nucleare la formazione dell'infiammasoma. Riferimenti correlati: PMID:33093214, PMID:33731929, PMID:33731932
• L'espressione tissutale è ampia, con livelli elevati nelle cellule immunitarie primarie (neutrofili, monociti/macrofagi, cellule dendritiche, linfociti) e nell'epitelio ghiandolare dei tratti gastrointestinale, respiratorio e riproduttivo. Viene anche rilevato nella pelle (cheratinociti, fibroblasti, follicoli piliferi), nei neuroni cerebrali e nelle cellule germinali testicolari. Riferimenti correlati: PMID:11113115, PMID:17164409, PMID:15285719, PMID:23349227, PMID:27662089
• A livello subcellulare, NLRP1 si localizza nel citoplasma, citosol e nucleo e viene reclutato nel complesso dell'infiammasoma dopo l'attivazione. Lega l'ATP ed esibisce attività ATPasica, che potrebbe essere necessaria per la sua funzione. Riferimenti correlati: PMID:11113115, PMID:15212762, PMID:33243852
• I ruoli biologici chiave includono l'immunità innata, la risposta infiammatoria, la difesa antivirale e l'interazione ospite-virus. Le mutazioni in NLRP1 sono associate a malattie autoinfiammatorie e displasia ectodermica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blotting, NLRP1 ha un peso molecolare previsto di ~166 kDa. Utilizzare un gel di poliacrilammide a bassa percentuale (es. 6–8%) e tempi di trasferimento umido prolungati (durante la notte a bassa tensione) per garantire un trasferimento efficiente di questa grande proteina. Includere un marcatore precolorato ad alto peso molecolare come riferimento.
• Per IHC-P, si raccomanda il recupero dell'antigene (tampone citrato o EDTA, indotto dal calore). Validare l'anticorpo nel tessuto di interesse (umano, topo o ratto) con appropriati controlli positivi e negativi e titolare per minimizzare il background.
• Per IF/ICC, ottimizzare la fissazione (es. PFA al 4%) e la permeabilizzazione (es. Triton X-100 allo 0,1%) per consentire l'accesso all'antigene prevalentemente citoplasmatico/nucleare. La colorazione combinata con marcatori di organelli può aiutare a confermare la localizzazione.
• Come anticorpo policlonale, ogni lotto può presentare lievi variazioni; raccomandiamo esperimenti pilota per stabilire le diluizioni di lavoro ottimali per il vostro specifico saggio e sistema di campionamento.

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