mAb coniglio anti-NPY per Western Blot, Immunofluorescenza, Immunoistochimica, ELISA - P01303

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di NPY

• Neuropeptide Y (NPY), noto anche come PYY4, è un peptide di 36 aminoacidi della famiglia dei polipeptidi pancreatici, codificato dal gene NPY (GeneID: 4852). È uno dei neuropeptidi più abbondanti e ampiamente distribuiti nel sistema nervoso dei mammiferi.
• NPY agisce come ligando ad alta affinità per i recettori accoppiati a proteine G NPY1R e NPY2R, innescando l'inibizione dell'adenilato ciclasi e un aumento dei livelli di Ca²⁺ intracellulare (PubMed:1321422, PubMed:7592910, PubMed:35165283, PubMed:38882210). Riferimenti correlati: PMID:1321422 PMID:7592910 PMID:35165283 PMID:38882210
• Attraverso questa segnalazione, NPY stimola centralmente l'assunzione di cibo e regola l'omeostasi energetica, mentre a livello periferico modula la secrezione di ioni colici e la contrattilità della muscolatura liscia.
• NPY è localizzato prevalentemente nelle vescicole secretorie, in particolare nelle grandi vescicole a denso nucleo dei neuroni, e viene rilasciato dopo stimolazione per agire come neuromodulatore e ormone. Si trova anche nelle cellule cromaffini del midollare surrenale.
• La preproteina di NPY subisce una scissione proteolitica in siti dibasici e un'amidazione C-terminale per generare il peptide maturo biologicamente attivo.
• Le parole chiave per NPY includono neuropeptide, amidazione, scissione su coppia di residui basici, fosfoproteina, vescicola citoplasmatica e secrezione, che riflettono le sue vie di sintesi, processazione e rilascio.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico derivato da NPY umano, quindi l'anticorpo riconosce probabilmente un epitopo lineare. È previsto che funzioni bene in applicazioni denaturanti come il Western blotting.
• Per WB, utilizzate lisati di cervello, ipotalamo o intestino. NPY è un peptide piccolo (circa 11 kDa); assicuratevi di utilizzare gel a bassa percentuale o gradienti e standard proteici appropriati. Considerate l'aggiunta di inibitori di proteasi per prevenire la degradazione.
• Per immunofluorescenza (IF) e immunoistochimica (IHC), il recupero dell'antigene può aumentare il segnale. I metodi di fissazione (ad es. 4% PFA) sono compatibili, ma convalidateli nel vostro tessuto specifico perché NPY è un peptide secreto e rapidamente degradato.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per cattura o rilevazione, ma l'accoppiamento con un altro anticorpo anti-NPY per la sandwich ELISA richiede un'ottimizzazione empirica.

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