Anticorpo Policlonale di Coniglio PAK1 per WB ed ELISA - Q13153

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PAK1

• PAK1 (chinasi 1 attivata da p21), nota anche come alpha-PAK o p65-PAK, è una serina/treonina-proteina chinasi codificata dal gene PAK1 sul cromosoma 11. Lo splicing alternativo produce più isoforme.
• PAK1 svolge un ruolo centrale nella dinamica del citoscheletro, nell'adesione cellulare, migrazione, proliferazione, apoptosi e mitosi integrando segnali da integrine e recettori tirosin-chinasici (PubMed:10551809, PubMed:11896197, PubMed:12876277). Riferimenti correlati: PMID:10551809, PMID:11896197, PMID:12876277
• Attivata dalle GTPasi CDC42 e RAC1, PAK1 collega queste GTPasi della famiglia Rho alla via della chinasi MAP JNK, e fosforila anche MAP2K1 per innescare cascate MAPK a valle (PubMed:8805275, PubMed:9528787). Riferimenti correlati: PMID:8805275, PMID:9528787
• Nel citoscheletro di actina, PAK1 riorganizza le fibre di stress e i complessi di adesione focale, e fosforila la catena leggera della miosina (MYL9/MLC2) per regolare la contrattilità actomiosinica (PubMed:9032240, PubMed:9395435). Riferimenti correlati: PMID:9032240, PMID:9395435
• PAK1 protegge dall'apoptosi fosforilando direttamente BAD, e fosforila anche RAF1, promuovendone la traslocazione mitocondriale e la fosforilazione di BAD (PubMed:11733498). Riferimenti correlati: PMID:11733498
• A livello subcellulare, PAK1 si localizza nel citoplasma, nelle adesioni focali, lamellipodi, membrane delle ruffles, invadopodi, nucleoplasma e centrosoma, riflettendo i suoi molteplici ruoli.
• PAK1 è sovraespressa in cellule e tessuti di cancro gastrico e contribuisce alla migrazione e invasione delle cellule tumorali attraverso vie mediate da RUFY3 (PubMed:25766321). Riferimenti correlati: PMID:25766321
• Ulteriori funzioni includono la regolazione della secrezione di insulina, il rimodellamento della cromatina, la stabilità sinaptica del recettore GABA(A) e la formazione delle spine dendritiche, evidenziando i suoi ruoli pleiotropici (PubMed:22669945, PubMed:23260667). Riferimenti correlati: PMID:22669945, PMID:23260667

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 130-250 di PAK1 umano, una regione che può essere conservata tra specie; la reattività crociata con il ratto è confermata, ma specie aggiuntive dovrebbero essere validate individualmente.
• Per il western blotting (WB), ci si aspetta una banda intorno ai 61 kDa; tuttavia, lo splicing alternativo e le modifiche post-traduzionali possono produrre bande multiple. Considerare l'uso di lisati cellulari totali da linee cellulari umane o di ratto note per esprimere PAK1, come HeLa o A431.
• Per applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo contro l'immunogeno ricombinante o la proteina nativa in una matrice appropriata; le diluizioni di lavoro ottimali dovrebbero essere determinate empiricamente.
• A causa del ruolo di PAK1 nell'apoptosi e nella migrazione, monitorare le condizioni di coltura cellulare (es. privazione di siero, confluenza) poiché possono influenzare i livelli di espressione.

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