Anticorpo policlonale di coniglio anti-pan-Akt per WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P31749/P31751/Q9Y243

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di Pan-Akt (AKT1/AKT2/AKT3)

• AKT1 è una serina/treonina-proteina chinasi appartenente alla famiglia delle chinasi AKT (inclusi AKT1, AKT2, AKT3) che regola il metabolismo, la proliferazione, la sopravvivenza cellulare, la crescita e l'angiogenesi. Riferimenti correlati: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• Media l'assorbimento del glucosio indotto dall'insulina attraverso la traslocazione di SLC2A4/GLUT4 e regola la sintesi del glicogeno inibendo GSK3A e GSK3B.
• AKT1 promuove la sopravvivenza cellulare attraverso la fosforilazione di MAP3K5/ASK1 in corrispondenza di 'Ser-83', inibendo l'apoptosi indotta dallo stress ossidativo. Riferimenti correlati: PMID:11154276
• Attiva la segnalazione di mTORC1 fosforilando TSC2, determinando la sintesi proteica e la crescita cellulare. Riferimenti correlati: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 fosforila i fattori di trascrizione FOXO (FOXO1, FOXO3, FOXO4), determinandone la ritenzione citoplasmatica e l'inibizione delle loro funzioni pro-apoptotiche. Riferimenti correlati: PMID:10358075
• Regola positivamente la trascrizione dipendente da NF-kappa-B e l'attività di CREB1, potenziando l'espressione dei geni pro-sopravvivenza (ad es. BCL2, MCL1). Riferimenti correlati: PMID:9829964
• A livello subcellulare, AKT1 si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nella membrana cellulare e nello spazio intermembrana mitocondriale, riflettendo i suoi diversi ruoli nella segnalazione.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono fosforilazione (attivazione), acetilazione, glicosilazione e ubiquitinazione, come evidenziato dalle parole chiave di UniProt.
• AKT1 è espresso ubiquitariamente nei tessuti umani, con livelli elevati nei tumori della prostata e della mammella, in particolare nella forma fosforilata Tyr-176 durante la progressione del tumore mammario.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende una regione conservata (aa 311-480) di AKT1, AKT2 e AKT3 umano, prevedendo un'ampia reattività pan-Akt nell'intera famiglia AKT.
• Per il western blotting, considerare bande multiple corrispondenti alle isoforme di AKT: ~48 kDa (AKT1), ~55 kDa (AKT2) e ~51/54 kDa (AKT3). Convalidare la specificità delle bande utilizzando controlli specifici per isoforma o il knockdown con siRNA.
• Per l'immunofluorescenza e l'immunoistochimica, la fissazione con metanolo o formaldeide è generalmente appropriata; tuttavia, può essere necessaria la permeabilizzazione per i bersagli intracellulari.
• Essendo un anticorpo policlonale, è prevedibile una variabilità tra lotti nel titolo e nell'affinità; si consiglia di titolare l'anticorpo per ogni nuovo lotto e applicazione.
• Nell'immunoprecipitazione, utilizzare beads di proteina A/G per una cattura ottimale delle IgG di coniglio.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere un tampone di coating e un sistema di rilevazione ottimizzati; testare più concentrazioni per massimizzare il rapporto segnale/rumore.

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