Anticorpo Policlonale di Coniglio PDK4 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16654

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PDK4

• PDK4 è una chinasi mitocondriale che fosforila specificamente le subunità alfa E1 della piruvato deidrogenasi (PDHA1 e PDHA2), portando all'inattivazione del complesso PDH.
• Attraverso la regolazione di PDH, PDK4 controlla il flusso di piruvato nel ciclo dell'acido tricarbossilico, riducendo così la respirazione aerobica e promuovendo l'utilizzo degli acidi grassi rispetto all'ossidazione del glucosio.
• PDK4 è essenziale per l'adattamento metabolico durante il digiuno e la fame: aiuta a mantenere l'omeostasi del glucosio nel sangue, previene un'eccessiva formazione di corpi chetonici e preserva il normale pH ematico in condizioni di privazione di nutrienti.
• La proteina si localizza nella matrice mitocondriale tramite un peptide di transito N-terminale e funge da chinasi nucleotidica legante ATP.
• Sebbene sia espressa in modo ubiquitario, PDK4 mostra i livelli più alti nel cuore e nel muscolo scheletrico, riflettendo la sua importanza in tessuti con elevato fabbisogno metabolico e flessibilità di combustibile.
• Oltre al controllo metabolico, PDK4 contribuisce alla generazione di specie reattive dell'ossigeno, protegge le cellule epiteliali distaccate dall'anoikis e influenza la proliferazione cellulare modulando il metabolismo dei carboidrati e dei lipidi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre una vasta regione interna (aa 102–411) di PDK4 umano; l'anticorpo policlonale risultante può riconoscere più epitopi, potenzialmente aumentando la sensibilità ma richiedendo anche appropriati controlli negativi.
• Per il western blot (WB), ci si aspetta una banda principale a circa 46 kDa; validare la specificità utilizzando lisati di tessuti o cellule con espressione nota di PDK4 (es. cuore, muscolo scheletrico) o knockdown con siRNA.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), considerare metodi di recupero dell'antigene e testare l'anticorpo su sezioni incluse in paraffina fissate in formalina provenienti da cuore o muscolo scheletrico; dovrebbe essere osservata una colorazione mitocondriale.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), confermare la localizzazione mitocondriale mediante doppia colorazione con un marcatore mitocondriale; le condizioni di fissazione e permeabilizzazione potrebbero richiedere ottimizzazione.
• È riportata reattività incrociata per uomo, topo e ratto; l'allineamento delle sequenze suggerisce epitopi conservati, ma gli utenti dovrebbero verificare le prestazioni nei loro specifici modelli sperimentali.

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