mAb di coniglio anti-PDXK per WB, IF/ICC, ELISA - O00764

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della PDXK

• La piridossal chinasi (PDXK) catalizza la fosforilazione delle forme della vitamina B6 introdotte con la dieta—piridossale, piridossina e piridossamina—nelle loro forme attive 5'-fosfato, tra cui il piridossal 5'-fosfato (PLP). Il PLP funge da cofattore essenziale per oltre 140 reazioni enzimatiche. Riferimenti correlati: PMID:10987144, PMID:17766369, PMID:19351586
• L'enzima è localizzato prevalentemente nel citoplasma e nel citosol.
• La PDXK è espressa ubiquamente, con livelli di espressione particolarmente elevati nei testicoli, inclusi i testicoli adulti e gli spermatozoi. Riferimenti correlati: PMID:31187503, PMID:9099727
• La PDXK è soggetta a regolazione post-traduzionale tramite acetilazione e fosforilazione e la sua attività dipende da cofattori metallici quali magnesio, manganese, zinco, cobalto e sodio, in linea con la sua funzione di legame all'ATP e di chinasi.
• Le mutazioni nella PDXK sono associate alla malattia di Charcot-Marie-Tooth di tipo 6C (HMSN6C), una neuropatia periferica, evidenziandone il ruolo cruciale nella salute neuronale.
• Lo splicing alternativo dà origine a molteplici varianti trascrizionali e la proteina è identificata come bersaglio proteomico nei dataset di riferimento.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione compresa tra gli amminoacidi 213–312 della PDXK umana; questa sequenza può presentare omologia con gli ortologhi di topo e ratto, supportando la reattività crociata riportata. I ricercatori dovrebbero verificare il riconoscimento del bersaglio atteso nel proprio sistema modello.
• Per il Western blot, la PDXK ha un peso molecolare previsto di circa 35 kDa, ma possono essere osservate più bande comprese tra circa 27 e 35 kDa a causa dell'espressione di isoforme o di modifiche post-traduzionali. Utilizzare controlli di caricamento e marcatori di peso molecolare appropriati.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica, linee cellulari derivate dai testicoli o cellule primarie possono fungere da controlli positivi a causa dell'elevata espressione della PDXK. Ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione.
• Nelle applicazioni ELISA, considerare l'utilizzo della proteina PDXK ricombinante come standard di riferimento per stabilire sensibilità e specificità.

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