Anticorpo monoclonale PE mouse anti-umano CD3 per citometria a flusso - P07766

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD3E

• CD3E codifica per la catena epsilon della glicoproteina CD3 della superficie dei linfociti T, che forma il complesso TCR-CD3 sui linfociti T e svolge un ruolo essenziale nella risposta immunitaria adattativa. Riferimenti correlati: PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098
• Dopo l'attivazione del TCR, la catena epsilon di CD3 trasmette i segnali di attivazione attraverso la membrana cellulare tramite i motivi di attivazione basati su tirosina del immunorecettore (ITAM), che sono fosforilati dalle chinasi della famiglia Src LCK e FYN. Riferimenti correlati: PMID:2470098 PMID:40592325
• Gli ITAM fosforilati fungono da siti di legame per la chinasi ZAP70, portando alla sua attivazione e all'inizio delle cascate di segnalazione a valle fondamentali per l'attivazione e lo sviluppo dei linfociti T.
• CD3E regola l'espressione superficiale del complesso TCR-CD3 mediando l'internalizzazione e la down-regolazione tramite sequenze di endocitosi nella sua regione citosolica. Riferimenti correlati: PMID:10384095 PMID:26507128
• Inoltre, CD3E agisce come recettore per ITPRIPL1, che inibisce l'attivazione dei linfociti T reclutando NCK1 e bloccando l'interazione CD3E-ZAP70, sopprimendo così la segnalazione ERK-NFkB e l'influsso di calcio. Riferimenti correlati: PMID:12110186 PMID:38614099
• La proteina contiene un dominio simile all'immunoglobulina, un'elica transmembrana e legami disolfuro, coerente con il suo ruolo di recettore della membrana cellulare (Parole chiave UniProt: Legame disolfuro, Dominio immunoglobulina, Transmembrana).
• La localizzazione subcellulare è principalmente sulla membrana cellulare.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Poiché questo anticorpo è direttamente coniugato al PE, evita cicli di congelamento e scongelamento e conservalo al riparo dalla luce per mantenere la stabilità del fluoroforo.
• Esegui la titolazione dell'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per la colorazione in citometria a flusso, minimizzando il legame non specifico e massimizzando il rapporto segnale/rumore.
• Includi controlli di isotipo e controlli di compensazione appropriati quando progetti pannelli di citometria a flusso multicolore che includono il PE.
• CD3 è espresso sui linfociti T maturi; utilizza quindi PBMC, sangue intero o linee cellulari T come campioni di controllo positivo.
• Valida la colorazione nel sistema biologico pertinente e conferma la specificità del bersaglio utilizzando controlli di knockout o knockdown ove possibile.

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