Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD117/c-Kit umano coniugato con PE per citometria a flusso - P10721

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD117/c-Kit

• CD117, noto anche come c-Kit, SCFR o PBT, è un recettore transmembrana tirosin-proteina chinasi codificato dal gene KIT; lo splicing alternativo produce molteplici isoforme (UniProt: P10721).
• Il ligando principale è il fattore delle cellule staminali (SCF/KITLG). Il legame del ligando induce la dimerizzazione e l'autofosforilazione del recettore, attivando cascate di segnalazione a valle che regolano la sopravvivenza, la proliferazione e la differenziazione cellulare nell'emopoiesi, nella melanogenesi, nella gametogenesi e nello sviluppo delle cellule mastocitarie.
• CD117 attivato recluta e fosforila proteine adattatrici ed enzimi chiave, tra cui PIK3R1 (PI3K), GRB2 e PLCG1, determinando l'attivazione delle vie AKT, RAS/MAPK e STAT (STAT1, STAT3, STAT5), nonché la produzione dei secondi messaggeri DAG e IP3.
• CD117 è localizzato prevalentemente sulla membrana cellulare, ma può essere presente anche nel citoplasma in seguito a internalizzazione e traffico intracellulare.
• Nel testicolo, CD117 è rilevato negli spermatogoni dello strato basale e nelle cellule interstiziali di Leydig; la sua espressione è mantenuta negli spermatozoi eiaculati (a livello proteico). Riferimenti correlati: PMID:20601678
• La proteina è fortemente glicosilata, contiene domini extracellulari di tipo immunoglobulinico e un dominio chinasi intracellulare, ed è classificata come proto-oncogene; i legami disolfuro e la fosforilazione sono caratteristiche strutturali e funzionali fondamentali.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è coniugato direttamente con PE, rendendolo adatto al rilevamento di CD117 mediante citometria a flusso in un'unica fase, senza necessità di un anticorpo secondario.
• L'immunogeno corrisponde alla regione extracellulare (aa 26–520) del CD117 umano, suggerendo la reattività con il recettore di superficie nativo.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il tipo di cellula e lo strumento specifici; includere controlli isotipici appropriati e fasi di blocco dei recettori Fc per ridurre al minimo il legame aspecifico.
• Validare l'espressione in linee cellulari umane note per essere positive a CD117 (ad es. TF-1, HMC-1) o in cellule ematopoietiche primarie.
• Poiché CD117 può essere internalizzato in seguito alla stimolazione con il ligando, considerare i tempi di fissazione e colorazione durante l'analisi di cellule attivate.

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