Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD158a/KIR2DL1 umano coniugato con PE per citometria a flusso - P43626

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD158a/KIR2DL1

• KIR2DL1, noto anche come CD158a, NKAT1 o p58.1, è un recettore delle cellule killer simile alle immunoglobuline (KIR) appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline, caratterizzato da domini immunoglobulinici extracellulari e da un'elica transmembrana.
• Funziona come recettore inibitorio sulle cellule natural killer (NK), riconoscendo specificamente alcuni alleli HLA-C (ad esempio, w4 e w6), e sopprime la citotossicità mediata dalle cellule NK per prevenire la lisi delle cellule bersaglio.
• Il recettore è una glicoproteina transmembrana con domini immunoglobulinici stabilizzati da ponti disolfuro, un peptide segnale e una coda citoplasmatica che trasduce segnali inibitori.
• KIR2DL1 è espresso principalmente sulla superficie delle cellule NK e svolge un ruolo fondamentale nella sorveglianza immunitaria e nella tolleranza al self monitorando l'espressione delle molecole MHC di classe I.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme del recettore e le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione legata all'N e la formazione di ponti disolfuro, essenziali per il corretto ripiegamento e la funzione.
• A livello subcellulare, KIR2DL1 si localizza sulla membrana cellulare, dove la sua regione extracellulare interagisce con i ligandi sulle cellule bersaglio, mentre il suo dominio intracellulare recluta fosfatasi per inibire i segnali di attivazione.
• La struttura tridimensionale di KIR2DL1, risolta mediante cristallografia, rivela le principali interfacce di legame con i ligandi e i cambiamenti conformazionali in seguito all'interazione con HLA-C.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio tipo cellulare e le condizioni sperimentali specifiche, poiché l'intensità della colorazione può variare tra i sottogruppi di cellule NK.
• Poiché l'immunogeno comprende il dominio extracellulare (amminoacidi 22–245), questo anticorpo è adatto alla colorazione di superficie di cellule vive e non fissate, senza necessità di permeabilizzazione.
• Validare l'anticorpo su linee cellulari NK ben caratterizzate o su cellule NK umane primarie per confermarne la specificità, poiché l'espressione di KIR2DL1 è distribuita in modo clonale e dipende dall'attivazione.
• Utilizzare controlli isotipici appropriati e, qualora si analizzino più membri della famiglia KIR, considerare pannelli multicolore con fluorocromi selezionati con attenzione per ridurre al minimo gli artefatti di compensazione.
• Quando viene utilizzato in saggi funzionali, considerare che il legame dell'anticorpo può bloccare il riconoscimento del ligando o simulare l'interazione con il recettore; eseguire test preliminari nel proprio sistema per valutare i potenziali effetti agonisti o antagonisti.

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