PE anticorpo monoclonale coniglio anti-umano CD177 per FC - Q8N6Q3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD177

• CD177 (noto anche come glicoproteina NB1, PRV-1, HNA-2a) è una glicoproteina di superficie cellulare ancorata a GPI espressa su una sottopopolazione di neutrofili maturi.
• In associazione con l'eterodimero dell'integrina beta-2 ITGAM/CD11b e ITGB2/CD18, CD177 media l'attivazione dei neutrofili stimolati con TNF, inclusa la degranulazione e la produzione di superossido. Riferimenti correlati: PMID:21193407
• CD177 previene l'internalizzazione dell'integrina beta-2 e attenua la segnalazione delle chemochine, modificando la risposta dei neutrofili dalla migrazione all'adesione. Riferimenti correlati: PMID:28807980
• Attraverso l'interazione eterofila con PECAM1 sulle cellule endoteliali, CD177 facilita la migrazione transendoteliale dei neutrofili in vitro. Riferimenti correlati: PMID:17580308
• Nonostante il suo ruolo nella migrazione transendoteliale in vitro, CD177 sembra non essere indispensabile per il reclutamento dei neutrofili durante l'infezione batterica in vivo. Riferimenti correlati: PMID:23461681
• CD177 agisce come recettore per la forma matura della proteasi PRTN3, esponendola sulla superficie cellulare dei neutrofili. Riferimenti correlati: PMID:17244676 PMID:18462208
• Presentando PRTN3 sulla superficie dei neutrofili, CD177 può migliorare l'integrità delle giunzioni delle cellule endoteliali durante la diapedesi dei neutrofili. Riferimenti correlati: PMID:23202369
• CD177 si localizza sulla membrana cellulare, nelle membrane raft, nelle vescicole secretorie, nelle membrane delle granule citoplasmatiche e nei lamellipodi.
• CD177 è altamente espresso nel midollo osseo normale e nei granulociti di pazienti con policitemia vera e trombocitemia essenziale. L'espressione inizia nello stadio di metamilocita durante la differenziazione dei neutrofili e la percentuale di neutrofili CD177 positivi varia ampiamente tra gli individui.
• La proteina subisce splicing alternativo e possiede un'ancora GPI; il suo peso molecolare varia tra le diverse isoforme.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Questo anticorpo è generato contro un immunogeno che copre gli amminoacidi 22-407, corrispondenti al dominio extracellulare di CD177 umano. Questa regione è ben esposta sulle cellule vive, rendendo l'anticorpo adatto per la rilevazione di CD177 di superficie cellulare in citometria a flusso.
• Per la citometria a flusso (FC), utilizzare appropriati controlli isotipici e titolare l'anticorpo per determinare le concentrazioni di colorazione ottimali. Includere una strategia di gating dei neutrofili (ad esempio, co-colorazione con CD16 e CD66b) per identificare le popolazioni che esprimono CD177.
• Poiché CD177 è espresso solo su una sottopopolazione di neutrofili e i livelli di espressione variano tra individui, si consiglia di analizzare una coorte di donatori e riportare la percentuale di positività anziché il numero assoluto di cellule.
• Si raccomanda la pre-incubazione con reagenti di blocco dei recettori Fc per ridurre al minimo il legame non specifico ai recettori Fcγ sui neutrofili.
• Questo anticorpo coniugato con PE è pronto all'uso; evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento e proteggerlo dalla luce per preservare la fluorescenza.
• La reattività crociata è stata confermata con campioni umani. Per l'utilizzo con altre specie, convalidare autonomamente il legame e la specificità.

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