Anticorpo monoclonale coniugato PE coniglio anti-umano CD235a/Glicoforina A per FC - P02724

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Glicoforina-A

• La Glicoforina-A (GYPA) è la principale sialoglicoproteina intrinseca di membrana degli eritrociti umani, codificata dal gene GYPA (noto anche come GPA, MNS). Lo splicing alternativo produce diverse isoforme e la proteina è altamente glicosilata, portando i determinanti del gruppo sanguigno MN sulla sua regione N-terminale extracellulare.
• La Glicoforina A è un componente del complesso ankirina-1, fondamentale per la stabilità e la forma della membrana eritrocitaria (PubMed:35835865). Riferimenti correlati: PMID:35835865
• È necessaria per la funzione ad alta attività dello scambiatore anionico SLC4A1 (banda 3) e ne promuove la traslocazione alla membrana plasmatica.
• Il dominio extracellulare funge da recettore per il virus dell'epatite A (HAV) e per l'antigene legante gli eritrociti 175 (EBA-175) di P. falciparum; il legame di EBA-175 dipende dai residui di acido sialico dei glicani O-legati.
• La localizzazione subcellulare è esclusivamente a livello della membrana cellulare, con una topologia transmembrana a singolo passaggio e una corta coda citoplasmatica.
• Le modifiche post-traduzionali includono un'estesa glicosilazione O-legata e fosforilazione; la proteina matura presenta un peso molecolare apparente di 13–16 kDa nonostante una massa teorica di ~16,4 kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 20-91) riconosce il dominio extracellulare, rendendo questo anticorpo coniugato PE adatto al rilevamento della CD235a nativa sulla superficie cellulare mediante citometria a flusso senza necessità di permeabilizzazione.
• La coniugazione diretta con PE elimina la necessità di un anticorpo secondario, riducendo il fondo e semplificando i protocolli di marcatura per pannelli FC multicolore.
• Si consiglia di titolare l'anticorpo su campioni ricchi di eritrociti (es. sangue intero, lisati di globuli rossi) o linee cellulari che esprimono CD235a per determinare la diluizione di lavoro ottimale.
• Utilizzare controlli isotipo appropriati e controlli di compensazione per validare la specificità e minimizzare la sovrapposizione spettrale nel proprio sistema sperimentale.

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