Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD48 umano coniugato con PE per citometria a flusso - P09326

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD48

• CD48, noto anche come SLAMF2 o BLAST-1, è una glicoproteina di superficie cellulare ancorata al glicosilfosfatidilinositolo (GPI), appartenente alla famiglia delle molecole di attivazione dei linfociti mediante segnalazione (SLAM). Presenta una regione extracellulare con due domini simili alle immunoglobuline e un'ancora GPI; lo splicing alternativo produce molteplici isoforme.
• CD48 interagisce, attraverso il suo dominio immunoglobulinico N-terminale, con i recettori di superficie cellulare CD244/2B4 o CD2, regolando la funzione e l'attivazione delle cellule immunitarie. Riferimenti correlati: PMID:12007789, PMID:19494291, PMID:27249817
• Media la trasduzione del segnale nelle cellule T associandosi a CD2 e reclutando efficacemente la protein-chinasi della famiglia Src LCK e LAT nel complesso TCR/CD3, promuovendo così la fosforilazione di LCK. Riferimenti correlati: PMID:12007789, PMID:19494291
• In seguito al legame con CD244, CD48 induce la fosforilazione dei motivi citoplasmatici di commutazione basati sulla tirosina dell'immunorecettore (ITSM) di CD244, avviando eventi di segnalazione che portano alla formazione della sinapsi immunologica e al rilascio diretto di granuli citolitici da parte dei linfociti T e delle cellule NK. Riferimenti correlati: PMID:27249817
• CD48 è localizzato nella membrana cellulare e nelle zattere di membrana; esiste anche una forma secreta, probabilmente derivante dal clivaggio dell'ancora GPI o dallo splicing alternativo.
• È ampiamente espresso su tutte le cellule ematopoietiche, inclusi linfociti, monociti e cellule dendritiche.
• La proteina contiene domini immunoglobulinici conservati e ponti disolfuro ed è soggetta a modificazioni post-traduzionali, tra cui la glicosilazione N-linked e l'ancoraggio al GPI.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per le applicazioni di citometria a flusso, titolare questo anticorpo coniugato con PE per determinare la concentrazione di colorazione ottimale per il tipo cellulare e le condizioni sperimentali utilizzate.
• Poiché CD48 è una proteina di superficie ancorata al GPI, la colorazione della superficie di cellule vive è generalmente sufficiente; evitare la permeabilizzazione, a meno che non sia specificamente necessaria la rilevazione intracellulare.
• Considerando la progettazione dell'immunogeno (dominio extracellulare, amminoacidi 27–220), si prevede che l'anticorpo riconosca la conformazione nativa di CD48; validare nel sistema di campioni pertinente, come cellule mononucleate del sangue periferico umano (PBMC) o linee cellulari ematopoietiche.
• Considerare l'utilizzo di un'adeguata fase di blocco dei recettori Fc per ridurre il legame aspecifico, soprattutto quando si lavora con cellule mieloidi.
• Data l'ampia espressione di CD48 sulle cellule ematopoietiche, progettare strategie di gating appropriate e includere controlli isotipici per distinguere la colorazione specifica.

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