PE Anticorpo monoclonale di coniglio anti-umano CD52 per citometria a flusso - P31358

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD52

• CD52, noto anche come antigene CAMPATH-1, HE5, CDW52 e EDDM5, è una glicoproteina ancorata a GPI localizzata prevalentemente sulla membrana cellulare.
• La proteina è espressa come un piccolo peptide maturo con un peso molecolare di circa 7 kDa, ancorato al doppio strato lipidico tramite una molecola di glicosilfosfatidilinositolo (GPI).
• Studi funzionali suggeriscono che CD52 possa svolgere un ruolo nella presentazione e nell'orientamento dei carboidrati, anche se la sua funzione biologica precisa rimane ancora completamente da chiarire.
• CD52 è stato originariamente identificato come antigene Cambridge pathology 1 ed è anche riconosciuto come proteina secretoria epididimale (HE5), il che indica ruoli specifici per tessuto nell'epididimo.
• La regione N-terminale extracellulare, che include il peptide immunogeno utilizzato, è accessibile per il legame con l'anticorpo, rendendo CD52 un bersaglio adatto per la rilevazione citofluorimetrica su cellule vive.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione N-linked e la proteina è attaccata alla membrana esclusivamente tramite un ancoraggio GPI, classificandola come lipoproteina.
• Le parole chiave associate a CD52 includono sequenziamento proteico diretto, struttura 3D e proteoma di riferimento, che riflettono le sue proprietà biochimiche ben caratterizzate.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1–61) di CD52 umano, che è extracellulare e esposto sulle cellule integre, confermando l'idoneità dell'anticorpo per la citometria a flusso su cellule vive.
• Essendo un anticorpo primario coniugato PE, non è necessaria una colorazione secondaria; la rilevazione diretta permette una progettazione semplificata di pannelli multicolore negli esperimenti di citometria a flusso.
• Si consiglia di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il tuo specifico tipo cellulare e il tuo strumento, e di includere appropriati controlli isotipici per valutare il legame non specifico.
• Convalidare la reattività dell'anticorpo su cellule note come positive per CD52, come linfociti umani o linee cellulari epiteliali epididimali, e includere un controllo negativo (ad esempio cellule knockout per CD52 o cellule non umane) per confermare la specificità.
• Per la colorazione della superficie cellulare, incubare con l'anticorpo a 4°C in presenza di blocco Fc per ridurre il potenziale fondo prima dell'acquisizione citofluorimetrica.

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