Anticorpo monoclonale PE Rabbit anti-Human CD8 PolymAb® per FC - P01732 / P10966

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD8

• Il gene CD8A codifica per la catena alfa della glicoproteina di superficie delle cellule T CD8, nota anche come antigene di differenziazione dei linfociti T T8/Leu-2.
• CD8 funziona come coreceptor glicoproteico di membrana integrale per le molecole MHC di classe I, legandosi simultaneamente al recettore delle cellule T (TCR) e al complesso MHC di classe I:peptide sulle cellule presentanti l'antigene.
• Dopo l'interazione con MHC di classe I, CD8 recluta la chinasi Src LCK nel complesso TCR-CD3, avviando la segnalazione intracellulare che promuove l'attivazione linfocitaria, la produzione di citochine e le funzioni effettrici delle cellule T citotossiche (CTL).
• CD8A è espresso sulle cellule T derivate dal timo principalmente come eterodimero legato da ponti disolfuro con CD8B, ma può anche formare omodimeri CD8A su sottopopolazioni di cellule natural killer (NK), cellule T di memoria, linfociti intraepiteliali, monociti e cellule dendritiche.
• L'omodimero CD8A sulle cellule NK supporta un meccanismo di sopravvivenza che facilita la coniugazione e la lisi di più cellule bersaglio, e promuove anche la differenziazione dei linfociti attivati in cellule T CD8 di memoria.
• CD8A si localizza sulla membrana cellulare come proteina transmembrana di tipo I a passaggio singolo; è stata anche identificata una forma secreta.
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono lo splicing alternativo, la formazione di ponti disolfuro, la glicosilazione N-linked e la palmitoilazione su un residuo di cisteina prossimo alla membrana, tutte critiche per la sua struttura e la sua funzione.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Per l'analisi citofluorimetrica, titolare l'anticorpo per determinare la diluizione di lavoro ottimale per il tuo specifico sistema sperimentale e tipo cellulare.
• Utilizzare controlli di isotipo appropriati e controlli a fluorescenza zero (FMO) per valutare il background e impostare un gating corretto.
• Proteggere l'anticorpo coniugato con PE dalla luce durante la manipolazione e lo stoccaggio per prevenire il fotobleaching.
• Questo anticorpo rileva sia le catene CD8A che CD8B; valutare la sua idoneità per l'identificazione di sottopopolazioni di cellule T CD8+ e altre popolazioni che esprimono CD8 come le cellule NK e le cellule dendritiche nelle cellule mononucleate del sangue periferico umano (PBMC).
• Eseguire la colorazione di superficie su cellule vive in condizioni standard; evitare se possibile la fissazione prima della colorazione, poiché può verificarsi la mascheramento dell'epitopo.

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