PE Monoclonale Anticorpo Rabbit anti-Complemento C3 Umano per FC - P01024

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Complemento C3

• C3 è una proteina precursore di ~187 kDa che viene clivata post-traduzionalmente in frammenti funzionali C3a (anafilotossina) e C3b (opsonina). Il frammento C3b contiene un legame tioestere reattivo che consente l'attacco covalente alle superfici dei patogeni.
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  PMID:6903192

• C3b opsonizza i patogeni e funge da componente non enzimatica della C5 convertasi in entrambe le vie complementari classica e alternativa, essenziale per la fagocitosi e la clearance immunitaria.
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• C3a è un'anafilotossina che media l'infiammazione locale legandosi al suo recettore C3AR1, innescando la degranulazione dei mastociti e dei basofili, il rilascio di citochine e la segnalazione attraverso recettori accoppiati a proteine G.
  Riferimenti correlati:
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• C3a agisce anche come potente chemiotattico per macrofagi e neutrofili, guidando la loro migrazione verso i tessuti infiammati.
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• Oltre al ruolo immunitario, C3 (conosciuto anche come proteina stimolante l'acilazione, ASP) funziona come ormone adipogeno che stimola la sintesi dei trigliceridi e il trasporto del glucosio negli adipociti attraverso il recettore C5AR2, regolando quindi la clearance lipidica postprandiale.
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• C3 è principalmente secreta nel plasma e viene prodotta da epatociti e adipociti. Dopo l'attivazione del complemento, C3b si deposita sulle superfici cellulari, consentendone la rilevazione tramite citometria a flusso sui tipi cellulari interessati.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1498–1663 del C3 umano, una regione all'interno del dominio C-terminale C345C coinvolto nel legame con C5 e nella formazione della convertasi. Questo progetto può favorire la rilevazione del C3 full-length e della catena α' di C3b.
• Essendo un anticorpo coniugato con PE, è pronto per l'uso diretto in citometria a flusso senza necessità di reagenti secondari. Per un segnale ottimale, titolare l'anticorpo (es. 0,5–5 µg per 10^6 cellule) e includere controlli di isotipo appropriati.
• Poiché C3 è una proteina secreta, è consigliabile prevedere fissazione e permeabilizzazione se è necessaria la colorazione intracellulare delle cellule che producono C3 (es. epatociti, adipociti). Per la rilevazione superficiale dei depositi di C3b sulle cellule bersaglio, la permeabilizzazione non è necessaria.
• Validare il test nel vostro sistema di campioni specifico, come sangue intero umano, cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC) o popolazioni cellulari purificate, e confermare che la reattività crociata è limitata al C3 umano come indicato.

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