PE Anticorpo monoclonale coniugato di coniglio anti-FGFR3 umano per Citometria a Flusso - P22607

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di FGFR3

• FGFR3 è un recettore tirosin-chinasico di superficie cellulare per i fattori di crescita dei fibroblasti, che controlla proliferazione, differenziazione e apoptosi.
• È essenziale per la differenziazione dei condrociti e il corretto sviluppo scheletrico; mutazioni gain-of-function causano acondroplasia e nanismi correlati.
• Il legame del ligando innesca l'autofosforilazione e attiva la segnalazione a valle tramite FRS2, portando alle vie RAS-MAPK e AKT; si verifica anche la fosforilazione di PLCG1.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme, inclusa un'isoforma secreta 3 che lega i FGF e può antagonizzare la segnalazione.
• Il recettore a lunghezza intera si localizza principalmente alla membrana cellulare, con ulteriori pool in vescicole citoplasmatiche e nel reticolo endoplasmatico; l'isoforma secreta è extracellulare.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, legami disolfuro che stabilizzano i suoi domini immunoglobulinici e fosforilazione come parte dell'attivazione della chinasi; l'ubiquitinazione regola la degradazione del recettore.
• Un'elevata espressione è osservata in cervello, rene e testicolo, mentre l'espressione è bassa in milza, cuore e muscolo; i tessuti fetali mostrano livelli elevati in rene, polmone, intestino e cervello.
• Malattie: Le mutazioni attivanti di FGFR3 sono collegate a displasie scheletriche, craniosinostosi e sordità; sovraespressione o attivazione costitutiva si osservano nel cancro alla vescica, mieloma multiplo e altre neoplasie maligne.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (a.a. 23-375), suggerendo che l'anticorpo riconosca un epitopo sulla superficie cellulare, compatibile con la citometria a flusso su cellule vive.
• Per FC, utilizzare linee cellulari umane FGFR3-positive (es. carcinoma della vescica RT4) e includere appropriati controlli isotipo; titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale di colorazione.
• Valutare la reattività incrociata con altri membri della famiglia FGFR se si utilizza la multiplexazione; confermare la specificità con validazione knockout o knockdown nel proprio sistema.
• La fissazione e la permeabilizzazione possono consentire il rilevamento di pool recettoriali intracellulari ma potrebbero alterare l'accessibilità dell'epitopo; valutare attentamente i protocolli di fissazione.
• Essere consapevoli delle multiple isoforme; se necessario, selezionare linee cellulari di riferimento validate o controlli di proteina ricombinante per verificare il riconoscimento dell'isoforma.

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