Anticorpo monoclonale di coniglio anti-GPRC5D umano coniugato a PE per citometria a flusso - Q9NZD1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di GPRC5D

• GPRC5D appartiene alla famiglia dei recettori accoppiati alle proteine G, gruppo C, sottogruppo 5, e funziona come recettore della membrana cellulare coinvolto nello sviluppo di capelli e unghie regolando l'espressione della cheratina dura.
• Il gene che codifica GPRC5D umano si trova sul cromosoma 12 ed è soggetto a splicing alternativo, producendo varianti che possono influenzare la funzione o la localizzazione della proteina.
• GPRC5D è ampiamente espresso nel sistema periferico, con elevata espressione nel pancreas, espressione media nel rene, nell'intestino tenue, nella milza e nei testicoli, e livelli bassi o non rilevabili nel cervello, nel cuore, nel fegato e in altri tessuti.
• A livello subcellulare, GPRC5D è localizzato nella membrana cellulare, coerentemente con il suo ruolo di trasduttore transmembrana del segnale.
• Gli studi strutturali (struttura 3D disponibile) rivelano che GPRC5D contiene sette eliche transmembrana, tipiche dei GPCR, e presenta un dominio extracellulare N-terminale probabilmente coinvolto nel legame con il ligando.
• Questo recettore è stato identificato mediante approcci proteomici ed è classificato come trasduttore con stato di proteoma di riferimento, sottolineandone la rilevanza biologica.
• Sebbene sia principalmente associato alla cheratinizzazione, GPRC5D potrebbe partecipare anche ad altri percorsi di segnalazione, data la sua ampia distribuzione tissutale e la sua natura di GPCR.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1-100) di GPRC5D. I ricercatori devono verificare che l'epitopo sia accessibile nel proprio sistema sperimentale, in particolare se stanno studiando forme clivate o modificate del recettore.
• Questo anticorpo coniugato a PE è validato per la citometria a flusso (FC). Nella progettazione degli esperimenti di FC, è necessario considerare l'uso di controlli isotipici e controlli di compensazione appropriati per garantire il rilevamento accurato dell'espressione di superficie di GPRC5D.
• Considerato l'intervallo di peso molecolare riportato (34–38 kDa), verificare che la banda osservata nei campioni sia coerente con la dimensione prevista, tenendo eventualmente conto della glicosilazione o di altre modifiche post-traduzionali che possono alterare il peso apparente.
• Per i tessuti con bassa espressione di GPRC5D (ad es. polmone e colon), potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione dei protocolli di colorazione, ad esempio aumentando la concentrazione dell'anticorpo o utilizzando l'amplificazione del segnale.
• Se si esegue una FC multiplex, verificare che la fluorescenza PE non si sovrapponga agli altri fluorofori del pannello e titolare l'anticorpo per ottenere un rapporto segnale/rumore ottimale.

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