Anticorpo monoclonale di coniglio anti-LGR5 (GPR49) umano coniugato con PE per citometria a flusso - O75473

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di LGR5

• LGR5, noto anche come GPR49, GPR67 e HG38, è un recettore accoppiato a proteine G contenente ripetizioni ricche di leucina che funge da recettore per le R-spondine.
• Potenzia la via di segnalazione canonica Wnt associandosi ai recettori LRP6 fosforilati e frizzled in seguito al legame con la R-spondina, aumentando l'espressione dei geni bersaglio.
• A differenza dei GPCR classici, LGR5 non attiva le proteine G eterotrimeriche per trasdurre i segnali.
• LGR5 è un marcatore ben consolidato delle cellule staminali dell'epitelio intestinale e del follicolo pilifero e svolge un ruolo cruciale nello sviluppo e nel mantenimento delle cellule staminali intestinali adulte durante lo sviluppo post-embrionale.
• A livello subcellulare, LGR5 è localizzato nella membrana cellulare, nell'apparato di Golgi e nella membrana della rete trans-Golgi.
• È espresso nel muscolo scheletrico, nella placenta, nel midollo spinale e in regioni cerebrali, nonché specificamente alla base delle cripte nelle cellule staminali della mucosa del colon e dell'intestino tenue; è stata osservata una sovraespressione nei tumori ovarici, del colon e del fegato.
• La proteina è soggetta a splicing alternativo e contiene caratteristiche strutturali chiave quali legami disolfuro, natura glicoproteica, ripetizioni ricche di leucina e sette eliche transmembrana.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione intracellulare C-terminale (amminoacidi 480-580), potenzialmente adatta al rilevamento dell'espressione totale di LGR5; verificare l'accessibilità dell'epitopo nel proprio protocollo di citometria a flusso.
• Per la citometria a flusso, assicurarsi di permeabilizzare adeguatamente le cellule qualora si prendano di mira epitopi intracellulari, oppure utilizzare protocolli di colorazione di superficie se l'epitopo è esposto sulla superficie cellulare.
• Convalidare le prestazioni dell'anticorpo in tipi cellulari pertinenti noti per esprimere LGR5, quali organoidi intestinali, linee cellulari di carcinoma colorettale o cellule del follicolo pilifero, includendo controlli positivi e negativi.
• Considerata la bassa espressione di LGR5 in alcune popolazioni di cellule staminali, valutare strategie di amplificazione del segnale o l'impiego di controlli con proteina ricombinante per ottimizzare il rilevamento.

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