Anticorpo monoclonale PE coniglio anti-umano NT5E/CD73 per Citometria a Flusso - P21589

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NT5E/CD73

• NT5E/CD73, noto anche come ecto-5'-nucleotidasi, è una proteina di membrana cellulare ancorata mediante glicosilfosfatidilinositolo (GPI) che catalizza l'idrolisi dei monofosfati nucleotidici extracellulari nei corrispondenti nucleosidi e fosfato inorganico.
• L'enzima mostra una preferenza per l'AMP come substrato, ma può anche idrolizzare IMP, UMP, GMP, CMP e monofosfati diossiribonucleotidici come dAMP, dCMP e dTMP. Riferimenti correlati: PMID:21933152, PMID:22997138, PMID:23142347
• NT5E mostra selettività per i monofosfati ribonucleotidici rispetto alle forme deossiribosiche. Riferimenti correlati: PMID:34403084
• La proteina è localizzata sulla membrana cellulare, dove regola la segnalazione purinergica convertendo l'AMP extracellulare in adenosina, un potente metabolita immunosoppressivo.
• NT5E è un membro della famiglia delle 5'-nucleotidasi e richiede ioni di zinco per la sua attività idrolitica, come indicato dai domini di legame metallico.
• L'impianto alternativo del gene NT5E produce più varianti di trascritto, anche se il significato funzionale di tutte le isoforme non è stato completamente caratterizzato.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione N-linked, formazione di ponti disolfuro e l'aggiunta di un'ancora GPI che lega l'enzima alla superficie cellulare.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Questo anticorpo monoclonale coniugato con PE è progettato per la rilevazione diretta in citometria a flusso di CD73 sulla superficie di cellule umane vive. Assicurarsi che le cellule siano vitali per preservare l'integrità della membrana e una presentazione ottimale dell'epitopo.
• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa. 27-547), quindi si prevede che l'anticorpo riconosca un epitopo accessibile sulla superficie cellulare senza necessità di permeabilizzazione.
• Per ottenere risultati ottimali, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il tuo specifico tipo cellulare e le tue condizioni di colorazione. In genere, 0,1–1 µg per 1×10^6 cellule è un intervallo di partenza ragionevole.
• Includere appropriati controlli isotipici e controlli di compensazione quando si esegue la citometria a flusso multicolore per tenere conto del legame non specifico e della sovrapposizione spettrale.
• L'espressione di CD73 può essere modulata dall'attivazione cellulare; se rilevante per il tuo studio, considera di convalidare l'anticorpo sia in campioni a riposo che stimolati.

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