Anticorpo Monoclonale PE Coniugato, Coniglio anti-Umano Fosfo-Istone H2AX-S139 per Citometria a Flusso - P16104

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H2AX

• L'istone H2AX è una variante dell'istone H2A che sostituisce l'H2A convenzionale in un sottoinsieme di nucleosomi.
• Svolge un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, riparazione del DNA, replicazione del DNA e stabilità cromosomica compattando il DNA in cromatina.
• H2AX è fondamentale per la risposta al danno al DNA; in seguito a rotture a doppio filamento, viene rapidamente fosforilato in Ser139 (γ-H2AX), formando foci che reclutano proteine di riparazione.
• È necessario per l'arresto del ciclo cellulare mediato da checkpoint in risposta a basse dosi di radiazioni ionizzanti.
• La localizzazione subcellulare è nucleare, specificamente sui cromosomi.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione, che ne regolano la funzione nella riparazione del DNA e nella dinamica della cromatina.
• Può anche svolgere ruoli nella meiosi e nelle interazioni ospite-virus.

Linee Guida Sperimentali e Consigli Tecnici

• Poiché l'anticorpo riconosce un sito di fosforilazione, considerare l'inclusione di inibitori della fosfatasi durante la preparazione e la colorazione delle cellule.
• Per la citometria a flusso intracellulare, i tamponi di fissazione e permeabilizzazione appropriati dovrebbero essere ottimizzati per preservare l'epitopo fosforilato.
• La coniugazione con PE consente il rilevamento diretto; evitare l'uso di anticorpi secondari coniugati a PE.
• Validare l'anticorpo in campioni di controllo positivi e negativi rilevanti, come cellule irradiate rispetto a cellule non trattate.
• Titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale di colorazione per la specifica configurazione sperimentale.

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