Anticorpo monoclonale PE coniglio anti-Podoplanina umana per Citofluorimetria - Q86YL7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Podoplanina

• La podoplanina (PDPN), nota anche come Aggrus, Gp36 e T1-alfa, è una glicoproteina transmembrana fortemente O-glicosilata che svolge ruoli critici nell'adesione cellulare, nella migrazione e nella transizione epiteliale-mesenchimale (EMT).
• Durante lo sviluppo, la PDPN media la separazione tra vasi sanguigni e linfatici legandosi a CLEC1B sulle piastrine, innescando l'attivazione e l'aggregazione piastrinica. Riferimenti bibliografici: PMID:14522983 PMID:15231832 PMID:17222411
• L'interazione con CD9 attenua l'aggregazione piastrinica indotta da PDPN, evidenziando un meccanismo regolatorio nella trombosi. Riferimenti bibliografici: PMID:18541721
• Attraverso il legame con MSN o EZR, la PDPN promuove l'EMT innescando l'attivazione di RHOA, che aumenta la migrazione e l'invasività delle cellule tumorali. Riferimenti bibliografici: PMID:17046996 PMID:21376833
• La PDPN interagisce con CD44 per indurre la migrazione cellulare direzionale sia in contesti epiteliali normali che tumorali. Riferimenti bibliografici: PMID:20962267
• Nelle cheratinociti, la PDPN induce drastici cambiamenti morfologici, tra cui forma allungata, protrusioni di membrana e maggiore motilità, riducendo al contempo l'adesione cellulare. Riferimenti bibliografici: PMID:15515019
• La PDPN controlla la stabilità degli invadopodi e la degradazione della matrice extracellulare (ECM) nelle cellule tumorali attraverso l'asse di segnalazione RHOC-ROCK-LIMK-CFL1, favorendo la metastatizzazione. Riferimenti bibliografici: PMID:25486435
• La PDPN si localizza in specifici sottodomini di membrana come lamellipodi, filopodi, microvilli, ruffling e zolle di membrana, ed è presente anche nel citoplasma; è altamente espressa nella placenta, nel polmone e nel muscolo scheletrico, con espressione debole nel cervello, nel rene e nel fegato, ed è sovraregolata nei carcinomi colorectal e orali squamosi. La proteina ha un peso molecolare previsto di ~17 kDa ma migra a 36–43 kDa a causa dell'estesa glicosilazione e della modificazione con acido sialico.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 21–123), quindi l'anticorpo riconosce l'epitopo nativo di superficie; è particolarmente adatto per la rilevazione con citofluorimetria (FC) della PDPN su cellule vive.
• Poiché questo anticorpo è direttamente coniugato con ficoeritrina (PE), si raccomanda di eseguire una titolazione per determinare la concentrazione ottimale di colorazione, senza necessità di un anticorpo secondario.
• Includere appropriati campioni di controllo non colorati e di isotipo per impostare le gate e valutare la fluorescenza di fondo negli esperimenti di FC.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo in linee cellulari con espressione nota di PDPN (es. cellule polmonari o placentari) e considerare l'utilizzo di cellule che sovraesprimono PDPN come controllo positivo.

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