Anticorpo monoclonale PE Rabbit anti-Human Siglec-8 per FC - Q9NYZ4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Siglec-8

• Siglec-8, noto anche come SAF-2 (membro 2 della famiglia della sialoadesina), è una glicoproteina di membrana di tipo I a passaggio singolo appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline. Lo splicing alternativo genera isoforme multiple.
• Siglec-8 media l'adesione alle cellule del sangue dipendente dall'acido sialico, legandosi preferenzialmente all'acido sialico legato in α-2,3 con una certa affinità per i legami α-2,6; le interazioni cis sulla stessa superficie cellulare possono mascherare il sito di legame del ligando. Riferimenti correlati: PMID:10625619, PMID:10856141
• Riconosce specificamente l'acido N-acetilneuraminico terminale (acido sialico) e il galattosio 6-O-solfato sottostante, con una forte preferenza per gli epitopi glicanici sialil-Lewis X solfatati in posizione 6-Gal. Riferimenti correlati: PMID:27357658
• La proteina è espressa prevalentemente sulla superficie di eosinofili, basofili e mastociti, rendendola un marcatore specifico per questi tipi cellulari negli studi ematopoietici.
• La localizzazione subcellulare è principalmente a livello della membrana plasmatica, coerentemente con il suo ruolo nelle interazioni cellula-cellula e nella segnalazione.
• Siglec-8 contiene domini simili alle immunoglobuline e ponti disolfuro, tipici delle molecole di adesione, ed è modificato post-traduzionalmente tramite glicosilazione.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 17-363), suggerendo che l'anticorpo riconosca probabilmente epitopi esposti in superficie, rendendolo adatto alla citometria a flusso su cellule vive non permeabilizzate.
• Per le applicazioni di citometria a flusso, titolare l'anticorpo coniugato con PE per determinare la concentrazione di colorazione ottimale utilizzando linee cellulari rilevanti o cellule primarie note per esprimere Siglec-8 (ad esempio, popolazioni di eosinofili, basofili o mastociti).
• Includere controlli isotipici appropriati e passaggi di blocco del recettore Fc per ridurre al minimo il legame aspecifico.
• Validare la specificità della colorazione nel sistema di campioni previsto, considerando l'espressione riportata di Siglec-8 su basofili, eosinofili e mastociti umani.
• Si noti che esistono molteplici isoforme proteiche (44, 46, 54 kDa), ma il coniugato PE è progettato per il rilevamento della superficie cellulare e non distinguerà le varianti di peso molecolare.

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