Anticorpo monoclonale coniugato PE coniglio anti-umano TLR3 per citometria a flusso (intracellulare) - O15455

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TLR3

• Il recettore di tipo Toll 3 (TLR3), noto anche come CD283, è una proteina di membrana di tipo I a passaggio singolo appartenente alla famiglia dei recettori di riconoscimento dei pattern (PRR) dei recettori di tipo Toll.
• Agisce come sensore chiave dell'RNA a doppio filamento virale (dsRNA), innescando risposte immunitarie innate attraverso la via dell'adattatore TRIF/TICAM1, portando all'attivazione di NF-κB, alla traslocazione nucleare di IRF3 e alla successiva produzione di citochine pro-infiammatorie e interferone di tipo I.
• La proteina contiene un dominio extracellulare ricco di ripetizioni di leucina (LRR) responsabile del riconoscimento del ligando, un'elica transmembrana e un dominio citoplasmatico TIR (Toll/interleuchina-1 recettore) essenziale per la segnalazione a valle.
• Si localizza principalmente sulla membrana del reticolo endoplasmatico e nei compartimenti endosomiali (inclusi gli endosomi precoci), dove incontra il dsRNA virale internalizzato.
• TLR3 è altamente espresso nella placenta e nel pancreas, ed è il TLR espresso più fortemente nel cervello, in particolare negli astrociti, nella glia e nei neuroni. Si trova anche nelle cellule dendritiche immature CD11c+.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione N-legata, fosforilazione, formazione di legami disolfuro e ubiquitinazione (legame isopeptidico) — tutte contribuiscono alla stabilità, al traffico e alla competenza di segnalazione del recettore.
• Lo splicing alternativo produce più isoforme e le varianti genetiche in TLR3 sono state associate alla suscettibilità alle malattie, inclusi disturbi immunitari e neurologici.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un frammento ricombinante corrispondente al dominio extracellulare (aa 24-339). Per la citometria a flusso intracellulare, assicurarsi di utilizzare protocolli adeguati di fissazione e permeabilizzazione cellulare per consentire all'anticorpo di accedere alla proteina bersaglio.
• Considerare la titolazione dell'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per la specifica configurazione sperimentale, poiché l'efficienza della colorazione può variare in base al tipo cellulare e al metodo di fissazione.
• Utilizzare controlli biologici appropriati (ad es., cellule non stimolate vs. cellule stimolate con poly(I:C)) e controlli isotipo per verificare la specificità della colorazione.

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