Anticorpo monoclonale PE di coniglio anti-TNF-α umano per FC (intracellulare) - P01375

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del fattore di necrosi tumorale

• Il fattore di necrosi tumorale alfa (TNF-α), codificato dal gene TNF sul cromosoma 6 umano, è una citochina pro-infiammatoria fondamentale e un membro della superfamiglia dei ligandi del TNF (TNFSF2).
• Viene prodotto come proteina transmembrana di tipo II e rilasciato come omotrimero solubile dopo il clivaggio, principalmente dai macrofagi attivati.
• Il TNF-α si lega a TNFRSF1A/TNFR1 e TNFRSF1B/TNFBR, attivando vie di segnalazione che possono portare all'apoptosi, alla necroptosi o all'attivazione di geni pro-infiammatori.
• È un potente pirogeno e induttore della cachessia e, in determinate condizioni, può stimolare la proliferazione e la differenziazione cellulare.
• Il TNF-α promuove l'osteoclastogenesi e il riassorbimento osseo, contribuendo alla perdita di massa ossea nelle malattie infiammatorie.
• Il TNF-α promuove l'angiogenesi inducendo sinergicamente la produzione di VEGF con IL1B e IL6. Riferimenti correlati: PMID:12794819
• Nell'artrite reumatoide, il TNF-α compromette la funzione delle cellule T regolatorie tramite la defosforilazione di FOXP3 attraverso l'aumento della regolazione di PP1. Riferimenti correlati: PMID:23396208
• Agisce come mediatore chiave della morte cellulare nell'azione antitumorale dei neutrofili stimolati con BCG combinati con un mimetico di DIABLO/SMAC nelle cellule tumorali della vescica. Riferimenti correlati: PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• La forma del dominio intracellulare (ICD) del TNF-α può indurre la produzione di IL-12 nelle cellule dendritiche.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare solubile (aa 77-233) del TNF-α umano, suggerendo il riconoscimento sia del precursore legato alla membrana sia della forma matura secreta.
• Per la citometria a flusso intracellulare, ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione cellulare per garantire il rilevamento accurato del TNF-α citoplasmatico, poiché la proteina viene principalmente secreta.
• Includere controlli isotipici appropriati e controlli non stimolati per distinguere la colorazione specifica dal segnale di fondo, soprattutto nelle cellule immunitarie attivate.
• Convalidare le prestazioni dell'anticorpo nel tipo cellulare e nelle condizioni di attivazione specifici del proprio esperimento, poiché i livelli di espressione del TNF-α possono variare.

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