PE Coniglio anti-Umano/Scimmia CD16 Anticorpo Monoclonale per FC - P08637/O75015

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD16

• Il CD16, noto anche come FCGR3, esiste come due isoforme: FCGR3A (CD16a) e FCGR3B (CD16b), codificate da geni distinti (FCGR3A e FCGR3B) che condividono un'alta omologia di sequenza e mediano il legame del frammento Fc IgG. Riferimenti correlati: PMID:11711607 PMID:21768335 PMID:22023369

• Il CD16a, espresso sulle cellule NK e sui monociti, innesca la citotossicità cellulare dipendente da anticorpi (ADCC) all'ingaggio di complessi antigene-IgG raggruppati, portando alla lisi delle cellule bersaglio e alla produzione di citochine, fondamentale per l'immunità antivirale e antitumorale. Riferimenti correlati: PMID:24412922 PMID:25786175 PMID:29967280 PMID:9916693

• La segnalazione attraverso il CD16a coinvolge la fosforilazione degli adattatori contenenti ITAM, attivando le vie PI3K e il flusso di calcio; questo porta sia alla degranulazione che alla produzione di citochine pro-infiammatorie, con esiti di segnalazione distinti a seconda dello stato di fosforilazione del recettore. Riferimenti correlati: PMID:1825220 PMID:23024279 PMID:2532305

• Il CD16a svolge un ruolo fondamentale nel meccanismo degli anticorpi monoclonali terapeutici, migliorando l'ADCC contro le cellule tumorali; le IgG afucosilate mostrano un'affinità più elevata per il CD16a, risultando in funzioni effettrici più potenti. Riferimenti correlati: PMID:27670158 PMID:34485821 PMID:28566370

• Durante l'infezione secondaria del virus Dengue, il CD16a può mediare il potenziamento dipendente da anticorpi (ADE) facilitando l'ingresso virale nelle cellule mieloidi tramite complessi immunitari IgG1-virus afucosilati, aggravando la patogenesi.

• Il CD16a è una glicoproteina transmembrana localizzata prevalentemente sulla membrana cellulare delle cellule NK e di un sottoinsieme di monociti circolanti; viene generata anche una forma secreta solubile, contribuendo alle sue diverse funzioni.

• La proteina è caratterizzata da domini simili a immunoglobuline, legami disolfuro e glicosilazione N-legata, essenziali per la sua integrità strutturale e il legame del ligando; la fosforilazione modula ulteriormente la sua capacità di segnalazione.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo coniugato con PE per determinare la concentrazione ottimale per il tipo di cellule specifico e le condizioni sperimentali, utilizzando PBMC umani o campioni di scimmia cinomolgo come controlli positivi.
• Includere controlli di isotipo appropriati e passaggi di blocco Fc per minimizzare il legame non specifico, specialmente quando si analizzano cellule che esprimono recettori Fc.
• Il fluoroforo PE è luminoso e adatto per il rilevamento di bersagli a bassa abbondanza; considerare la sua compatibilità con altri fluorofori durante la progettazione di pannelli multicolor e garantire una corretta compensazione.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo nell'applicazione prevista, come saggi reporter ADCC o profilo delle cellule immunitarie, utilizzando replicati biologici rilevanti e stati di attivazione.
• Questo anticorpo può essere applicabile anche per lo studio delle isoforme CD16 in saggi funzionali; la reattività crociata con il cinomolgo supporta modelli di ricerca traslazionale.

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