PE Anticorpo monoclonale coniugato di coniglio anti-CD18 Umano/Scimmia per Citometria a Flusso - P05107

Specifiche e Parametri Nucleari del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Integrina beta-2

• L'Integrina beta-2 (CD18) forma recettori eterodimerici con le integrine alfa (CD11a-d), legando ICAMs, iC3b, fibrinogeno e VCAM1, governando l'adesione e la comunicazione leucocitaria (PubMed:1676048, PubMed:23775590, PubMed:10438935, PubMed:8777714, PubMed:9841932, PubMed:38195629). Riferimenti correlati: PMID:1676048 | PMID:23775590 | PMID:10438935 | PMID:8777714 | PMID:9841932 | PMID:38195629
• Questa integrina media la transmigrazione leucocitaria e l'adesione delle cellule T/neutrofili, essenziale per il trafficking delle cellule immunitarie e l'infiammazione (PubMed:11812992, PubMed:28807980, PubMed:18587400). Riferimenti correlati: PMID:11812992 | PMID:28807980 | PMID:18587400
• Il CD18 partecipa alla clearance fagocitica tramite il riconoscimento di ICAM3 sui neutrofili apoptotici e di ICAM4 sugli eritrociti, nonché alla citotossicità delle cellule natural killer (PubMed:23775590, PubMed:16985175, PubMed:15356110). Riferimenti correlati: PMID:23775590 | PMID:16985175 | PMID:15356110
• L'integrina β2 agisce come recettore di segnalazione nella sinapsi immunologica, dove l'interazione LFA-1–ICAM1 accoppia la stimolazione del TCR alla forza di adesione (PubMed:38195629). Riferimenti correlati: PMID:38195629
• È una glicoproteina transmembrana contenente domini simili all'EGF, siti di legame per calcio/magnesio, ed è espressa su tutti i leucociti, con alti livelli sui neutrofili; le mutazioni causano la deficienza di adesione leucocitaria di tipo 1.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno copre l'intero dominio extracellulare (aa 1-769) del CD18 umano, suggerendo che l'anticorpo probabilmente bersaglia un epitopo esposto in superficie appropriato per la citometria a flusso su cellule vive.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo coniugato a PE su tipi cellulari rilevanti (es. PBMC umane) per determinare la concentrazione ottimale di colorazione e minimizzare il fondo.
• Includere un controllo isotipo appropriato e la discriminazione cellule vive/morte per garantire la rilevazione specifica dei leucociti CD18+.
• Validare la cross-reattività con il macaco cinomolgo testando su PBMC o leucociti isolati da questa specie.
• Poiché il CD18 è altamente espresso sui neutrofili, pre-bloccare i recettori Fc o utilizzare reagenti di blocco FcR per ridurre il legame aspecifico.
• Il marcatore PE permette la rilevazione a laser singolo; assicurarsi le impostazioni di compensazione se si utilizza in multiplex con altri fluorocromi.

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