PE Coniglio anti-Umano/Scimmia CD45 mAb - P08575

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD45

• Il CD45, noto anche come antigene leucocitario comune (L-CA) e T200, è una fosfatasi proteica tirosinica di tipo recettoriale C codificata dal gene PTPRC.
• È essenziale per l'attivazione delle cellule T tramite il recettore dell'antigene, agendo come regolatore positivo della co-attivazione dopo il legame con DPP4.
  Riferimenti correlati: PMID:35767951
• La proteina contiene due domini fosfatasi; il primo ha attività enzimatica e il secondo modula la specificità del substrato. Defosforila molecole di segnalazione chiave come SKAP1, FYN e LYN.
• Il CD45 è una proteina di membrana di tipo I a passaggio singolo situata nei raft di membrana e alla sinapsi immunologica.
• Più isoforme (1–8) sono generate da splicing alternativo, con espressione specifica del tessuto; le isoforme 1,2,3,5,7 sono rilevate nei timociti.
• Gioca un ruolo nella modulazione della segnalazione immunitaria, inclusa l'interazione con CLEC10A per limitare l'autoreattività, e può agire come recettore per l'UL11 del citomegalovirus umano, compromettendo la proliferazione delle cellule T.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione e fosforilazione; la proteina appartiene alla famiglia delle fosfatasi proteiche ed è collegata a varianti della malattia dell'immunodeficienza combinata grave (SCID).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo monoclonale coniugato con PE è ottimizzato per il rilevamento diretto tramite citometria a flusso del CD45 di superficie sulle cellule vive. Considerare di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il sistema sperimentale.
• Includere controlli di isotipo appropriati e controlli fluorescence-minus-one (FMO) per garantire la specificità.
• L'immunogeno copre la regione extracellulare (aa 26–577), quindi l'anticorpo riconosce il CD45 espresso sulla superficie. Confermare la colorazione di superficie utilizzando un colorante di vitalità per escludere le cellule morte.
• È stata riportata reattività crociata con il CD45 di cinomolgo; convalidare le prestazioni nei campioni di primati non umani pertinenti se necessario.
• Le isoforme del CD45 hanno pesi molecolari variabili (131–147 kDa); migrare di conseguenza in WB come controllo positivo, sebbene questo prodotto sia convalidato solo per FC.

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