Anticorpo monoclonale di coniglio anti-HLA-DR umano/di scimmia coniugato con PE per citometria a flusso - P01903

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'HLA-DR

• HLA-DRA codifica la catena alfa della molecola MHC di classe II HLA-DR. Forma un eterodimero con la catena beta per presentare peptidi antigenici sulle APC professionali alle cellule T CD4+, guidando le funzioni effettrici dei linfociti T helper.
  Riferimenti correlati:
  PMID:15265931, PMID:15322540, PMID:17334368

• Presenta tipicamente peptidi extracellulari di 10-30 amminoacidi generati da antigeni internalizzati per endocitosi nei lisosomi, con un residuo ancora idrofobico di grandi dimensioni essenziale in posizione 1 del peptide per il legame all'MHC II.
  Riferimenti correlati:
  PMID:8145819

• Nel microambiente tumorale, HLA-DR presenta peptidi provenienti dalle APC residenti nel tumore tramite la fagocitosi di cellule tumorali apoptotiche o la macropinocitosi di proteine secrete.
  Riferimenti correlati:
  PMID:31495665

• Presenta inoltre peptidi intracellulari self tramite macroautofagia, un processo fondamentale per la selezione delle cellule T timiche e la tolleranza centrale.
  Riferimenti correlati:
  PMID:17182262, PMID:23783831

• La selezione degli epitopi immunodominanti coinvolge due modalità di processamento: «prima il legame, poi il taglio/rifinitura» per i peptidi estranei e «prima il taglio, poi il legame» per i peptidi self.
  Riferimenti correlati:
  PMID:25413013

• A livello subcellulare, HLA-DR si localizza sulla membrana cellulare, nel reticolo endoplasmatico, negli endosomi precoci e tardivi, nei lisosomi e negli autolisosomi.

• A livello proteico, è espresso nelle APC professionali (macrofagi, cellule dendritiche, cellule B) e nelle cellule epiteliali timiche.
  Riferimenti correlati:
  PMID:15322540, PMID:23783831, PMID:31495665

• Le modifiche post-traduzionali includono ponti disolfuro e glicosilazione N-linked; si tratta di una glicoproteina transmembrana a singolo passaggio.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per la citometria a flusso, questo anticorpo coniugato con PE può essere utilizzato per la colorazione mediante immunofluorescenza diretta di cellule vive che esprimono HLA-DR. Titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio campione e strumento.
• L'immunogeno è la proteina HLA-DR umana ricombinante a lunghezza intera, il che suggerisce che l'anticorpo riconosca probabilmente la conformazione nativa sulla superficie cellulare. La reattività crociata con la scimmia cinomolgo è confermata; pertanto, il prodotto può essere impiegato in studi immunologici su primati non umani.
• Validare la colorazione con appropriati controlli isotipici e coloranti per la vitalità nel proprio sistema sperimentale. Se necessario, prendere in considerazione fasi di blocco per ridurre il legame aspecifico.
• Per ottenere risultati ottimali, assicurarsi che i campioni siano mantenuti al freddo e analizzati tempestivamente dopo la colorazione, al fine di preservare l'integrità degli antigeni di superficie.

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