Anticorpo monoclonale PE di coniglio anti-IgM di topo per FC - P01872

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione delle IgM

• La catena pesante costante mu dell'immunoglobulina M (IgM) è codificata dal gene Ighm e costituisce la regione costante delle catene pesanti delle IgM. Lo splicing alternativo genera sia isoforme secrete (sIgM) sia isoforme legate alla membrana (mIgM).
• Le IgM legate alla membrana fungono da componente di riconoscimento dell'antigene del complesso del recettore delle cellule B (BCR), fornendo una segnalazione tonica costitutiva essenziale per la sopravvivenza delle cellule B e mediando la segnalazione del pre-BCR per l'esclusione allelica durante lo sviluppo delle cellule B.
• Le IgM secrete formano prevalentemente pentameri e occasionalmente esameri, consentendo il legame multivalente agli antigeni con elevata avidità. Sia le sIgM naturali polireattive sia le sIgM immunitarie specifiche per l'antigene sono necessarie per risposte immunitarie umorali efficienti contro i patogeni. Riferimenti correlati: PMID:10899913, PMID:28135254, PMID:34788614
• Le sIgM mediano le funzioni effettrici principalmente attraverso i recettori Fc e il sistema del complemento. Si legano al recettore Fc ad alta affinità FCMR sulle cellule linfoidi, promuovendo l'induzione di risposte IgG neutralizzanti e della tolleranza verso il self. Reclutano C1q per attivare la via classica del complemento, facilitando la neutralizzazione dei patogeni. Insieme a C1q e alla lectina legante il mannosio, le sIgM promuovono la fagocitosi delle cellule apoptotiche, garantendo la rimozione di potenziali epitopi autoimmuni. Riferimenti correlati: PMID:10899913, PMID:11062505, PMID:28135254
• Nell'immunità mucosale, le sIgM vengono trasportate attraverso l'epitelio mucosale dal recettore polimerico delle immunoglobuline (PIGR) e secrete come IgM secretorie. I complessi IgM-antigene possono essere retrotranscitosi dalle FCMR sulle cellule M verso le cellule presentanti l'antigene nei tessuti linfoidi mucosali. Riferimenti correlati: PMID:34788614
• Le IgM di topo sono espresse a livello proteico nel midollo osseo e nelle cellule B-1 e B-2. La regione costante presenta domini immunoglobulinici, ponti disolfuro intra- e intercatena e siti di glicosilazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 105–454 all'interno della regione costante delle IgM di topo (P01872), suggerendo che l'anticorpo riconosca il dominio costante della catena pesante mu e non debba mostrare reattività crociata con altri isotipi di immunoglobuline.
• Questo anticorpo coniugato con PE consente il rilevamento diretto mediante citometria a flusso delle IgM di superficie o intracellulari senza la necessità di reagenti secondari. Ottimizzare la colorazione titolando l'anticorpo su linee cellulari B di topo pertinenti o su linfociti primari e includere controlli isotipici appropriati.
• Per il rilevamento delle IgM citoplasmatiche, è possibile utilizzare una fissazione e permeabilizzazione delicate; validare questi passaggi nel proprio sistema per preservare l'integrità dell'epitopo e le prestazioni del fluoroforo.

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