Anticorpo monoclonale coniglio anti-mouse S100A9 coniugato PE per citometria a flusso intracellulare - P31725

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di S100A9

• S100A9 è una proteina legante il calcio e lo zinco che svolge un ruolo fondamentale nella regolazione dei processi infiammatori e della risposta immunitaria, inclusa la chemiotassi dei neutrofili, la fagocitosi e la degranulazione.
  Riferimenti correlati: PMID:15331440, PMID:17767165, PMID:18403730
• A livello intracellulare, S100A9 facilita il traffico e il metabolismo dell'acido arachidonico nei leucociti, modula il citoscheletro dipendente dalla tubulina durante la migrazione dei fagociti e attiva l'NADPH-ossidasi neutrofilica.
  Riferimenti correlati: PMID:15331440
• A livello extracellulare, S100A9 esercita attività pro-infiammatorie, antimicrobiche, di scavenging degli ossidanti e di induzione dell'apoptosi.
  Riferimenti correlati: PMID:21382888
• S100A9 agisce come un allarme o pattern molecolare associato al danno (DAMP), stimolando le cellule immunitarie innate legandosi al recettore Toll-like 4 (TLR4) e al recettore per i prodotti finali di glicazione avanzata (AGER).
  Riferimenti correlati: PMID:17767165, PMID:18403730, PMID:19402754
• Il legame con TLR4 e AGER attiva le vie di segnalazione MAP-chinasi e NF-kappa-B, amplificando la cascata pro-infiammatoria.
  Riferimenti correlati: PMID:17767165, PMID:18403730, PMID:19402754
• Esiste principalmente come eterodimero calprotectina (S100A8/S100A9), che integra le funzioni immunitarie intracellulari ed extracellulari.
• Esibisce attività antimicrobica contro batteri e funghi, probabilmente tramite chelazione dello Zn²⁺ essenziale per la crescita microbica.
• S100A9 è prevalentemente secreto ma può essere trovato anche nel citoplasma, associato al citoscheletro e sulla membrana cellulare.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina ricombinante che copre l'intera lunghezza di S100a9 di topo (residui 1–113); pertanto ci si aspetta che l'anticorpo riconosca la S100A9 nativa nella citometria a flusso intracellulare. Per una colorazione ottimale, eseguire la fissazione e la permeabilizzazione adeguate per le proteine nucleari/citoplasmatiche e titolare l'anticorpo coniugato PE per determinare il rapporto segnale-rumore ottimale.
• S100A9 è altamente espresso nelle cellule della linea mieloide (neutrofili, monociti, macrofagi). Utilizzare controlli positivi pertinenti come midollo osseo di topo o splenociti e includere controlli di isotipo e blocco Fc per minimizzare il legame non specifico.
• Per la citometria a flusso intracellulare, confermare la specificità dell'anticorpo utilizzando cellule S100A9-knockout o bloccando con l'immunogeno ricombinante se disponibile.
• Dato che questo è un anticorpo primario coniugato PE, consente il rilevamento diretto in un unico passaggio, riducendo il rumore di fondo degli anticorpi secondari e semplificando i pannelli multicolore.

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