Anticorpo monoclonale PE coniglio contro ratto CD25 per citometria a flusso - P26897

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD25 (subunità alfa del recettore dell'interleuchina-2)

• CD25, noto anche come subunità alfa del recettore dell'interleuchina-2, IL-2Rα o antigene TAC, è una proteina di membrana di tipo I codificata dal gene Il2ra nel ratto (UniProt P26897).
• Funge da subunità alfa del recettore ad alta affinità per l'interleuchina-2 (IL-2). Insieme alle subunità beta (CD122) e gamma (CD132), lega l'IL-2 e media la segnalazione fondamentale per l'omeostasi immunitaria.
• Il recettore svolge un ruolo chiave nella tolleranza immunitaria controllando l'attività delle cellule T regolatorie (TREG), che sopprimono l'attivazione e l'espansione dei linfociti T autoreattivi.
• CD25 è espresso costitutivamente a livelli elevati sulle cellule T regolatorie CD4+Foxp3+ e viene upregolato transitoriamente sui linfociti T effectori attivati, rendendolo un marcatore importante per gli studi immunologici.
• La regione extracellulare contiene due domini Sushi (CCP/SCR), caratteristici delle proteine di controllo del complemento e coinvolti nel legame con il ligando.
• Le caratteristiche strutturali chiave includono un peptide segnale N-terminale, più ripetizioni Sushi, una singola elica transmembrana e una breve coda citoplasmatica. La proteina è modificata da glicosilazione N-linked e contiene legami disolfuro intracatena.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno per questo anticorpo monoclonale comprende gli amminoacidi 22-235 di CD25 di ratto, che corrisponde all'intero dominio extracellulare. Questo design bersaglia la regione nativa, distale dalla membrana, accessibile nelle cellule intatte.
• Come anticorpo coniugato con PE, è destinato principalmente alla citometria a flusso. Consigliamo una titolazione iniziale utilizzando un modello cellulare appropriato (ad esempio, splenociti di ratto attivati o linee cellulari T) per identificare la concentrazione di colorazione ottimale.
• Utilizzare un controllo di isotipo appropriato per discriminare la colorazione positiva dal fondo. Si consiglia un blocco appropriato del recettore Fc quando si colorano cellule con elevata espressione di FcγR.
• Poiché l'espressione di CD25 può essere sensibile alla fissazione e permeabilizzazione, convalidare il protocollo di preparazione del campione per preservare gli epitopi superficiali se si valutano marcatori di superficie cellulare.
• Per la rilevazione intracellulare di CD25, l'ottimizzazione delle fasi di permeabilizzazione è essenziale, poiché l'ostruzione sterica può alterare l'accessibilità dell'anticorpo.

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