PE/Cyanine7 Anticorpo Monoclonale Anti-Mouse Ly-6A/E (Sca-1) per Citometria a Flusso - P05533

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Antigene Linfocitario 6A-2/6E-1 (Sca-1)

• L'antigene linfocitario 6A-2/6E-1, comunemente noto come antigene delle cellule staminali 1 (Sca-1) o proteina attivatrice dei linfociti T (TAP), è codificato dal gene Ly6a nel topo e appartiene alla superfamiglia Ly-6/uPAR di proteine ancorate al glicosilfosfatidilinositolo (GPI).
• Sca-1 è un marcatore ben consolidato delle cellule staminali ematopoietiche e delle cellule progenitrici murine, ed è ampiamente espresso in diversi tessuti.
• La funzione primaria di Sca-1 è legata all'attivazione dei linfociti T, dove può modulare la segnalazione dopo il legame, contribuendo alla regolazione della risposta immunitaria.
• Sca-1 è ancorato al foglietto esterno della membrana plasmatica tramite un gruppo GPI, non possiede un dominio transmembrana o citoplasmatico e si affida all'associazione con i lipid rafts per la trasduzione del segnale.
• Come glicoproteina ancorata a GPI, Sca-1 subisce modificazioni post-traduzionali tra cui la glicosilazione N-legata e l'aggiunta dell'ancora GPI, cruciali per la sua localizzazione di membrana e funzione.
• La proteina contiene ponti disolfuro conservati che stabilizzano la sua caratteristica struttura a tre dita tipica della famiglia Ly-6, facilitando le interazioni proteina-proteina.
• Il peso molecolare osservato per Sca-1 spesso supera la sua massa calcolata (14,4 kDa) a causa dell'estesa glicosilazione, con una tipica rilevazione intorno a 115 kDa in SDS-PAGE in condizioni riducenti.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato generato utilizzando un immunogeno ricombinante che copre il dominio extracellulare (amminoacidi 27-111) di Sca-1 del topo, mirando alla conformazione nativa per un riconoscimento superiore in citometria a flusso.
• Per applicazioni di citometria a flusso, considerare di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale, e includere appropriati controlli isotipo e passaggi di blocco del recettore Fc per minimizzare il legame aspecifico.
• Notare che il coniugato PE/Cyanine7 è sensibile alla luce e ai cicli di congelamento-scongelamento; proteggere sempre dalla luce ed evitare ripetuti congelamenti.
• Validare la specificità dell'anticorpo nel ceppo di topo o nella linea cellulare rilevante, poiché esistono variazioni alleliche (es. Ly-6A.2 vs Ly-6E.1); l'immunogeno corrisponde all'allele Ly-6A.2.
• L'espressione di Sca-1 può essere up-regolata in seguito ad attivazione nei linfociti T; esperimenti di cinetica possono essere necessari per catturare cambiamenti dinamici nell'espressione.

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