Anticorpo monoclonale di coniglio anti-TIM-3/HAVCR2 umano coniugato a PE/Cyanine7 per citometria a flusso - Q8TDQ0

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di TIM-3/HAVCR2

• TIM-3/HAVCR2 (CD366) è un recettore della superficie cellulare che modula finemente l’immunità innata e adattativa, esercitando generalmente funzioni inibitorie, ma potendo anche fornire co-stimolazione a seconda del contesto cellulare e dell’interazione con il ligando.
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• Sopprime le risposte autoimmuni e alloreattive mediate dai Th1, promuove la tolleranza immunologica e attenua la segnalazione del TCR nei linfociti CD8+ bloccando NF-κB/NFAT e riducendo la secrezione di IL-2, probabilmente mediante l’associazione con LCK e il reclutamento di PTPRC dipendente da LGALS9; regola inoltre l’attivazione dei macrofagi.
  Riferimenti correlati: PMID:14556005 PMID:24337741 PMID:26492563 PMID:11823861
• Nelle cellule Treg, TIM-3 inibisce le risposte Th17, mentre nelle cellule NK svolge un ruolo duplice: potenzia la produzione di IFN-γ in seguito all’interazione con LGALS9, ma sopprime la citotossicità naturale.
  Riferimenti correlati: PMID:24838857 PMID:22323453 PMID:22383801
• Funziona da recettore per la galectina-9 (LGALS9), che può indurre l’apoptosi delle cellule T e l’immunosoppressione, sebbene questa interazione sia ancora oggetto di dibattito; TIM-3 lega inoltre la fosfatidilserina per mediare la fagocitosi delle cellule apoptotiche da parte delle cellule dendritiche.
  Riferimenti correlati: PMID:16286920 PMID:24337741 PMID:23555261
• A livello subcellulare, TIM-3 si localizza sulla membrana cellulare e nelle giunzioni cellulari. La sua espressione interessa i linfociti Th1, le Treg, le cellule dendritiche, le cellule NK e i tessuti epiteliali, con una marcata sovraespressione nelle infezioni virali croniche come HCV e HIV.
• Dopo la traduzione, TIM-3 è una glicoproteina soggetta a legami disolfuro, palmitoilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che riflettono un turnover regolato e interazioni di segnalazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L’immunogeno (aa 22‑200) copre l’intero dominio extracellulare, rendendo questo anticorpo particolarmente adatto al rilevamento di TIM‑3 di superficie mediante citometria a flusso su cellule vive; si consiglia di utilizzare il coniugato PE/Cyanine7 raccomandato per ottenere un segnale intenso e una sovrapposizione spettrale minima con i canali FITC e PE.
• Poiché l’espressione di TIM‑3 è altamente dinamica e aumenta in seguito all’attivazione delle cellule T, stimolare le cellule (ad esempio con anti‑CD3/CD28) oppure includere condizioni di attivazione note per migliorare la sensibilità di rilevamento.
• Quando si progettano pannelli multicolore, tenere conto del fotobleaching e del legame aspecifico di PE/Cyanine7; titolare l’anticorpo e includere controlli isotipici e FMO appropriati per garantire un gating accurato.
• L’anticorpo è validato su campioni umani; la reattività crociata con altre specie non è specificata, pertanto è necessario validarlo nel sistema di campioni pertinente qualora si lavori con cellule non umane.

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