Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD48 murino coniugato PE/Cyanine7 (citometria a flusso) - P18181

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD48

• CD48 (noto anche come BCM1, BLAST-1, SLAMF2, sgp-60) è una glicoproteina di superficie cellulare ancorata al glicosilfosfatidilinositolo (GPI), appartenente alla famiglia delle molecole di attivazione linfocitaria di segnalazione (SLAM).
• Media l'attivazione e la regolazione delle cellule immunitarie interagendo con recettori di superficie cellulare quali 2B4/CD244 e CD2 attraverso il suo dominio immunoglobulinico N-terminale. Riferimenti correlati: PMID:21278219, PMID:9881969
• Nei linfociti T, CD48 si associa a CD2 per reclutare la chinasi Src LCK e l'adattatore LAT nel complesso TCR/CD3, aumentando la fosforilazione di LCK e la segnalazione a valle. Riferimenti correlati: PMID:9881969
• Il legame di CD244 da parte di CD48 induce la fosforilazione degli ITSM in CD244, portando alla formazione della sinapsi immunologica e alla secrezione direzionata di granuli litici (perforina, granzimi) da parte dei linfociti T citotossici e delle cellule NK. Riferimenti correlati: PMID:21278219, PMID:9881969
• A livello subcellulare, CD48 si trova sulla membrana cellulare, è arricchito nelle zattere di membrana e può anche essere secreto in forma solubile.
• Le parole chiave UniProt includono ancoraggio GPI, dominio immunoglobulinico, ponte disolfuro, glicoproteina e lipoproteina, riflettendo le sue caratteristiche strutturali e l'associazione con la membrana.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 23-216 del CD48 murino) corrisponde al dominio extracellulare predetto, pertanto è probabile che l'anticorpo riconosca l'antigene nativo di superficie. Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale di colorazione utilizzando una linea cellulare pertinente o cellule primarie (ad esempio splenociti e timociti murini).
• Poiché CD48 è una proteina ancorata al GPI, la colorazione superficiale di cellule vive viene generalmente eseguita senza permeabilizzazione. Includere un controllo isotipico appropriato e controlli fluorescence-minus-one (FMO) per confermare la specificità.
• PE/Cyanine7 è un fluorocromo tandem; proteggerlo dall'esposizione prolungata alla luce per evitare il fotobleaching. La fissazione può alterare la fluorescenza del fluorocromo tandem, pertanto verificarne la compatibilità qualora sia necessaria una colorazione intracellulare.
• CD48 è espresso su tutte le cellule ematopoietiche ad eccezione degli eritrociti; utilizzare controlli positivi noti (ad esempio EL4, YAC-1) e controlli negativi per convalidare i profili di colorazione.

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