Anticorpo monoclonale coniugato PE/Cyanine7 di coniglio anti-CD8a di topo per FC - P01731

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della CD8a

• La CD8a (catena alfa della glicoproteina CD8 di superficie dei linfociti T), nota anche come Lyt-2, è una glicoproteina di membrana integrale essenziale per l'immunità adattativa.
• Agisce come corecettore per le molecole MHC di classe I sulle cellule presentanti l'antigene, permettendo ai linfociti T CD8+ di riconoscere i complessi peptide-MHC I e di avviare risposte citotossiche contro cellule infettate o tumorali.
• Dopo l'attivazione del TCR, la CD8a recluta la chinasi Src LCK al complesso TCR-CD3, innescando cascate di fosforilazione che portano alla produzione di linfochine, all'adesione e all'attivazione dei linfociti T citotossici.
• Nelle cellule NK, gli omodimeri di CD8a supportano la sopravvivenza e l'uccisione seriale delle cellule bersaglio facilitando la coniugazione e la lisi.
• La segnalazione tramite CD8a promuove la differenziazione dei linfociti attivati in linfociti T CD8+ della memoria, sostenendo l'immunità a lungo termine.
• La proteina si localizza esclusivamente sulla membrana cellulare come proteina transmembrana di tipo I a passaggio singolo, con un dominio immunoglobulinico extracellulare, un'elica transmembrana e una breve coda citoplasmatica.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la formazione di legami disolfuro, la glicosilazione N-linked e la palmitoilazione, che possono influenzare l'organizzazione della membrana e la segnalazione.
• Lo splicing alternativo produce multiple isoforme, anche se l'isoforma full-length è predominante nei linfociti T.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 28–196) della CD8a di topo, evitando le regioni transmembrana e citoplasmatiche; questo progetto è progettato per ottenere anticorpi che riconoscono la conformazione nativa della superficie cellulare.
• Questo coniugato PE/Cyanine7 è validato per citometria a flusso; assicurarsi di eseguire una titolazione appropriata (ad esempio, 0,25–1 µg per 10^6 cellule) e includere controlli di isotipo quando si analizzano linfociti di topo.
• Poiché la CD8a è coespressa con il TCR, si consiglia di eseguire una colorazione simultanea con anti-CD3 per distinguere i linfociti T CD8+ dalle cellule NK, che possono anche esprimere omodimeri di CD8a.
• Validare la specificità in ceppi di topo deficienti per CD8a o tramite blocco con anti-CD8a non coniugato per confermare il legame.
• Evitare l'esposizione prolungata alla luce per preservare la stabilità del fluoroforo; se diluito, utilizzare entro 24 ore dalla ricostituzione.

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