Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Ki67 di topo coniugato con PE/Cyanine7 per citometria a flusso (intracellulare) - E9PVX6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di Ki67

• Ki67 è un marcatore di proliferazione ampiamente riconosciuto, codificato dal gene Mki67; i nomi alternativi includono Antigene KI-67, Ki-67 e D630048A14Rik.
• Ki67 si associa ai cromosomi mitotici, formando strutture simili a spazzole che agiscono come tensioattivi per disperdere i cromosomi e impedirne il collasso in un'unica massa di cromatina (PubMed:27362226). Riferimenti correlati: PMID:27362226
• Questa proteina svolge un duplice ruolo: durante la mitosi precoce agisce come repellente cromosomico, mentre nella tarda anafase si trasforma in un attrattore cromosomico, facilitando il raggruppamento dei cromosomi attraverso la separazione di fase liquido-liquido.
• Ki67 non contribuisce all'architettura interna dei cromosomi mitotici, suggerendo che il suo ruolo principale consista nell'organizzazione mediata dalla superficie (PubMed:26949251). Riferimenti correlati: PMID:26949251
• La localizzazione subcellulare comprende il nucleo, il nucleolo e le superfici cromosomiche, in accordo con le sue dinamiche dipendenti dal ciclo cellulare.
• L'espressione di Ki67 è strettamente legata alla proliferazione cellulare: viene rilevata prevalentemente nelle cellule in ciclo ed è ampiamente utilizzata come marcatore della frazione proliferativa.
• Modifiche post-traduzionali come la fosforilazione e l'acetilazione ne regolano la funzione; inoltre, contiene domini di legame per l'ATP e per il DNA, con una preferenza per il DNA superavvolto e ricco in AT.
• La proteina è soggetta a splicing alternativo, che genera molteplici isoforme in grado di contribuire ai suoi diversi ruoli cellulari.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1816-2163 di Ki67 di topo; si consiglia di verificare la specificità in modelli knockout o knockdown.
• Per la citometria a flusso intracellulare (FC), ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per garantire un accesso adeguato dell'anticorpo a Ki67 nucleare.
• La co-colorazione con coloranti del DNA o altri marcatori del ciclo cellulare può migliorare l'analisi delle popolazioni cellulari proliferanti.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo nel tessuto o nella linea cellulare murina pertinente, utilizzando appropriati controlli isotipici.

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