Anticorpo monoclonale PerCP anti-CD45 (Ptprc) di topo per citometria a flusso - P06800

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD45

• Il CD45 (Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C), codificato dal gene Ptprc, è una glicoproteina transmembrana e un membro della famiglia delle proteine tirosina fosfatasi. È anche noto come Antigene comune dei leucociti (L-CA), Ly-5 e T200.
• La proteina subisce un ampio splicing alternativo, generando multiple isoforme con pesi molecolari che vanno da 130 kDa a 144 kDa, come rilevato da questo anticorpo.
• Il CD45 funge da regolatore positivo della segnalazione del recettore delle cellule T (TCR) defosforilando i residui di tirosina inibitori delle chinasi della famiglia Src come LYN, promuovendo così l'attivazione delle cellule T.
• In seguito all'attivazione delle cellule T, il CD45 recluta e defosforila effettori a valle tra cui SKAP1 e FYN, modulando le cascate di trasduzione del segnale.
• Il CD45 interagisce con DPP4, potenziando la co-attivazione delle cellule T, e con CLEC10A sulle cellule dendritiche, che riconosce il CD45 portante l'antigene Tn sulle cellule T effettrici per regolare le soglie di attivazione e limitare l'autoreattività.
• A livello subcellulare, il CD45 è localizzato sulla membrana cellulare, nei raft di membrana e nelle sinapsi immunologiche, posizionandolo in siti chiave per l'inizio del segnale immunitario.
• La proteina è fortemente glicosilata e fosforilata, modifiche essenziali per la sua integrità strutturale e attività enzimatica.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 26-566 del CD45 di topo (dominio extracellulare), suggerendo che l'epitopo/i si trovi nella regione extracellulare accessibile per la citometria a flusso su cellule vive.
• Per la citometria a flusso, considerare di titolare l'anticorpo per ottimizzare l'indice di colorazione e ridurre il fondo. Includere appropriati controlli isotipo e coloranti di vitalità.
• Poiché il CD45 è espresso su tutti i leucociti, assicurarsi strategie di gating appropriate per identificare le popolazioni cellulari di interesse.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo nel proprio specifico tipo di campione (ad es. milza, linfonodo, sangue) poiché la densità dell'antigene può variare.
• Evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento; conservare come raccomandato.

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