Anticorpo monoclonale PerCP di coniglio anti-CD45 umano/scimmia per citometria a flusso - P08575

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD45 (proteina tirosina-fosfatasi di tipo recettoriale C)

• Funziona come una protein-tirosina fosfatasi necessaria per l'attivazione dei linfociti T attraverso il recettore dell'antigene, come dimostrato da studi genetici. Regola positivamente la coattivazione dei linfociti T in seguito al legame con DPP4 e defosforila gli effettori a valle, tra cui SKAP1, FYN e LYN. Riferimenti correlati: PMID:35767951
• Agisce come recettore per la proteina UL11 del citomegalovirus umano (HCMV), mediando il legame di UL11 ai linfociti T. Questa interazione attenua la segnalazione del recettore dei linfociti T, riducendo la fosforilazione della tirosina e compromettendo la proliferazione dei linfociti T.
• È localizzato principalmente nella membrana cellulare, con un arricchimento nei raft di membrana e nella sinapsi immunologica, facilitando il suo ruolo nella trasduzione del segnale.
• Numerose isoforme derivano dallo splicing alternativo di PTPRC. Le isoforme 1, 2, 3, 5 e 7 sono rilevate nei timociti, mentre le isoforme 4, 6 e 8 sono assenti, indicando pattern di espressione delle isoforme strettamente regolati.
• CD45 è una proteina transmembrana di tipo I a singolo passaggio, fortemente glicosilata, con un peso molecolare previsto di circa 147 kDa, sebbene le isoforme rilevate varino da 131 a 147 kDa. Contiene due domini fosfatasici intracellulari e appartiene alla famiglia delle protein-tirosina fosfatasi.
• È classificato in base a parole chiave tra cui splicing alternativo, glicoproteina, fosfoproteina, sinapsi, interazione ospite-virus e variante associata alla malattia SCID, a riflettere i suoi molteplici ruoli.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato corrisponde agli amminoacidi 26-577 del CD45 umano, coprendo un'ampia regione extracellulare. Questo design favorisce il rilevamento del CD45 espresso sulla superficie di cellule vive e non fissate, rendendolo particolarmente adatto alle applicazioni di citometria a flusso.
• Essendo un coniugato PerCP, è necessario considerare la sovrapposizione spettrale con PE, PE-Cy5 e i coloranti tandem nei pannelli multicolore. Utilizzare controlli di compensazione appropriati e titolare l'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• L'anticorpo reagisce anche con il CD45 del macaco cinomolgo; validare i pattern di colorazione utilizzando controlli positivi pertinenti (ad es. PBMC umane, linfociti del sangue di macaco cinomolgo) e controlli negativi (ad es. linee cellulari CD45-negative).
• Per gli studi sui linfociti T, tenere presente che l'espressione delle isoforme varia tra i diversi sottogruppi di linfociti T e nelle varie fasi di differenziamento. Abbinare marcatori specifici della linea cellulare per identificare accuratamente le popolazioni.

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