mAb PerCP Coniugato con Anticorpo di Coniglio anti-CD8a Umano/Scimmia - P01732

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD8a

• CD8a (glicoproteina di superficie delle cellule T catena alfa CD8) è una glicoproteina transmembrana codificata dal gene CD8A (Gene ID: 925). È anche conosciuta come T8/Leu-2 e p32.
• Funge da co-recettore per le molecole MHC di classe I sulle cellule che presentano l'antigene, interagendo simultaneamente con il recettore delle cellule T (TCR) per reclutare la chinasi Src LCK, innescando segnalazione intracellulare che porta all'attivazione dei linfociti T citotossici, produzione di citochine, motilità e adesione.
• Svolge un ruolo critico nell'immunità adattativa consentendo ai linfociti T citotossici di riconoscere ed eliminare cellule infette e tumorali.
• Nelle cellule natural killer (NK), gli omodimeri di CD8A forniscono un meccanismo di sopravvivenza che permette la coniugazione e la lisi di più cellule bersaglio, e promuovono la sopravvivenza e la differenziazione dei linfociti attivati in cellule T CD8 di memoria.
• Il CD8 è tipicamente un eterodimero legato da ponti disolfuro tra le catene alfa (CD8A) e beta (CD8B) sulle cellule T di derivazione timica, ma può anche essere espresso come omodimero CD8A su sottopopolazioni di cellule NK, cellule T di memoria, linfociti intraepiteliali, monociti e cellule dendritiche.
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare e forme secrete; è una lipoproteina con un'elica transmembrana e subisce modificazioni post-traduzionali come glicosilazione, formazione di ponti disolfuro e palmitoilazione.
• Appartiene alla superfamiglia delle immunoglobuline, contenente un dominio immunoglobulina. Lo splicing alternativo produce diverse isoforme.
• Espresso sulle cellule dendritiche plasmacitoidi in seguito a stimolazione con virus herpes simplex-1, indicando un ruolo nelle risposte antivirali.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 22-182) copre il dominio extracellulare di CD8A, che si prevede generi anticorpi in grado di riconoscere la proteina nativa di superficie cellulare. Per la citometria a flusso, considerare di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il tuo specifico tipo cellulare e protocollo di colorazione.
• Poiché questo anticorpo è coniugato a PerCP, assicurarsi che il citofluorimetro sia dotato di laser e set di filtri appropriati (tipicamente eccitazione 488 nm, emissione 675 nm). Il PerCP è suscettibile al fotosbiancamento; maneggiare i campioni colorati al buio ed evitare esposizioni prolungate alla luce.
• La reattività incrociata è stata validata per umano e scimmia cinomolgo. Se si utilizzano altre specie, verificare l'omologia di sequenza della regione immunogena per prevedere una potenziale reattività incrociata e validare sperimentalmente.
• Per la colorazione intracellulare, potrebbe essere necessario un passaggio di permeabilizzazione. Includere appropriati controlli isotipo per distinguere la colorazione specifica.

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