Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD45 umano/macaco PerCP/Cyanine5.5 per citometria a flusso - P08575

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD45

• CD45, noto anche come antigene comune dei leucociti (L-CA) o T200, è una proteina tirosina fosfatasi di tipo recettoriale C codificata dal gene PTPRC. Dallo splicing alternativo derivano molteplici isoforme, con pesi molecolari compresi tra circa 131 e 147 kDa.
• CD45 è essenziale per l'attivazione delle cellule T attraverso il recettore dell'antigene e agisce come regolatore positivo della coattivazione in seguito al legame con DPP4. Recluta e defosforila SKAP1 e FYN e modula l'attività di LYN (PubMed:35767951). Riferimenti correlati: PMID:35767951
• Funziona come una proteina tirosina fosfatasi: il primo dominio PTPasi presenta attività enzimatica, mentre il secondo dominio influenza la specificità verso il substrato.
• CD45 interagisce con CLEC10A nel punto di contatto tra la cellula presentante l'antigene e la cellula T, dove CLEC10A sulle cellule dendritiche immature riconosce CD45 portatore dell'antigene Tn sulle cellule T effettrici, modulando la soglia di attivazione delle cellule T per limitare l'autoreattività.
• Durante l'infezione da citomegalovirus, CD45 funge da recettore per la proteina virale UL11, mediando il legame alle cellule T e determinando una riduzione della fosforilazione della tirosina delle proteine di segnalazione e una compromissione della proliferazione delle cellule T.
• È localizzato sulla membrana cellulare, nei rafts di membrana e nella sinapsi immunologica, in linea con il suo ruolo nella segnalazione.
• CD45 è una glicoproteina e una fosfoproteina, con ruoli fondamentali nell'interazione ospite-virus; le mutazioni sono associate alla SCID (immunodeficienza combinata grave).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina di fusione ricombinante comprendente gli amminoacidi 26-577 del CD45 umano (P08575). Questo dominio extracellulare è comunemente utilizzato come bersaglio nelle applicazioni di citometria a flusso; tenere conto di questo aspetto nella progettazione del pannello di marcatura.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di colorazione ottimale. Includere controlli isotipici appropriati e coloranti per la valutazione della vitalità. Poiché CD45 è espresso su tutte le cellule ematopoietiche, si raccomandano strategie di gating accurate per distinguere le sottopopolazioni leucocitarie.
• L'anticorpo presenta reattività crociata con il CD45 umano e del macaco cinomolgo (Cynomolgus). Quando si lavora con campioni di macaco cinomolgo, validare il profilo di colorazione nel sistema campione pertinente per confermare la reattività e la specificità.
• Esistono molteplici isoforme di CD45 (131-147 kDa) e l'anticorpo può riconoscere diverse isoforme a seconda della posizione dell'epitopo. Se è necessaria una rilevazione specifica per isoforma, confermare il riconoscimento mediante western blot o analisi antigenica.

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